【摘 要】
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[目的]构建小鼠Nanog基因原核表达载体并进行表达,以期得到大量GST融合蛋白.[方法]根据GeneBank中的Nanog序列及pGEX-KG中的多克隆位点设计引物,以含有Nanog基因片段的pNA992
【机 构】
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西北农林科技大学国家干细胞工程技术研究中心陕西分中心
【基金项目】
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国家＂863＂项目（2005AA21905）和教育部重大项目（03160）
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[目的]构建小鼠Nanog基因原核表达载体并进行表达,以期得到大量GST融合蛋白.[方法]根据GeneBank中的Nanog序列及pGEX-KG中的多克隆位点设计引物,以含有Nanog基因片段的pNA992重组质粒为模板,经PCR扩增出918 bp的DNA片段.将所得片段与pGEX-KG载体连接,转化TGⅠ大肠杆菌,筛选阳性克隆,其扩增片段测序结果与原序列一致,表明原核表达载体pGEX-KG-Nanog已构建成功.提取pGEX-KG-Nanog质粒转化到BL21（DE3）表达菌株中,经IPTG诱导后收集菌
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