应用鳗鲡肾脏细胞分离疱疹病毒及毒株理化性质试验

来源 :中国动物检疫 | 被引量 : 0次 | 上传用户:maotou528
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为研究鳗鲡疱疹病毒(Anguillid herpesvirus,AnHV)毒株的理化性质,用鳗鲡肾脏细胞(European eel kidney cell,EEK)从福建省某鳗鲡养殖场出现“脱黏败血病”典型症状的欧洲鳗鲡组织中分离得到一株病毒株,采用电镜观察、PCR检测和DNA测序对其进行鉴定,并对分离毒株进行温度和酸碱度敏感性试验.结果显示:分离毒株感染EEK可产生明显的细胞病变效应.细胞培养上清中存在直径近200 nm的病毒粒子,细胞核内有大量病毒粒子聚集.用AnHV特异性引物对病料组织和感染细胞培养物进行PCR检测,均能扩增出约394 bp的目的条带,PCR产物测序序列与所公布的AnHV基因序列相似性达99%以上.分离到的AnHV经30℃处理30 min后,滴度下降不显著;40℃、50℃处理30 min后,滴度均明显下降;60℃处理30 min后AnHV失活;AnHV经pH3和pH11处理后滴度均明显下降.本试验成功应用EEK分离鉴定出了一株AnHV,进一步证实了同源的细胞系分离同一鱼类病毒的有效性.该AnHV毒株对温度和酸碱度均比较敏感,可利用其理化性质防控鳗鲡疱疹病毒病发生.
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