探讨采用同位素标记相对和绝对定量（iTRAQ）技术的蛋白组学分析筛选增生性糖尿病视网膜病变（PDR）患者与玻璃体混浊患者玻璃体液之间差异表达蛋白的可行性，寻找PDR防治的新靶点。
方法实验研究。收集2016年9月至2017年11月在天津医科大学眼科医院就诊的PDR的患者28例，随机数字表法随机分为2个PDR组，每组14例；另将诊断为玻璃体混浊的患者4例作为对照组，随机分为2个对照组，每组2例。PDR患者与玻璃体混浊患者的平均年龄分别为52和64岁。将每组患者的样本混合后提取蛋白，行iTRAQ标记，根据液相质谱-串联质谱检测（LC-MS/MS）分析结果，行差异蛋白分析及相应蛋白基因本体论（GO）数据库功能富集及京都基因与基因组（KEGG）数据库通路图显著性富集分析。对玻璃体液蛋白谱的相对定量结果进行独立样本t检验，结合差异倍数（FC）和P值判定蛋白表达量变化。
结果根据不同患者的玻璃体液蛋白表达谱信息，发现其间共存在26个差异表达蛋白，PDR包括7个上调蛋白和19个下调蛋白，如视黄酸受体反应蛋白2（Chemerin）（PDR1组=85.0，PDR2组=83.0，对照1组=119.6，对照2组=120.2，FC=0.710，P=0.001）、轴突生长导向因子4B（Semaphorin 4B，Sema 4B）（PDR1组=64.4，PDR2组=68.8，对照1组=135.4，对照2组=146.0，FC=0.473，P=0.023）、载脂蛋白B（Apolipoprotein，ApoB）（PDR1组=104.4，PDR2组=106.6，对照1组=89.0，对照2组=85.3，FC=1.211，P=0.024）和热休克蛋白70（Heat shock protein 70，HSP70）（PDR1组=69.3，PDR2组=75.0，对照1组=137.7，对照2组=138.3，FC=0.523，P=0.026）与PDR的发生发展密切相关。通过对差异蛋白的GO功能显著性富集分析显示，差异基因的功能划分为生物过程、分子功能及细胞组分形成3大板块。差异表达基因功能涉及细胞代谢过程、有机氮化合物代谢过程、碳水化合物衍生物代谢过程及转移酶活化、跨膜信号受体活化等诸多方面。KEGG Pathway显著性富集分析结果显示，Chemerin参与的蛋白激酶B（Akt）信号通路，Sema 4B参与的磷脂酰肌醇3-激酶（phosphoinositide 3-kinase，PI3K）信号通路，及缺氧诱导因子-1α（HIF-1α）信号通路在2个组玻璃体液间存在差异。
结论应用iTRAQ标记结合LC-MS/MS定量蛋白组学为筛选有生物学意义的差异表达蛋白提供良好的平台，进而为差异蛋白定量检测及低丰度差异蛋白筛选奠定基础。Chemerin、Sema 4B、ApoB和HSP70可作为PDR防治的新靶点。（中华眼科杂志，2019，55：769-776）