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目的
观察高转移潜能肝癌(HCC)细胞外泌体与低转移潜能HCC细胞共培养对低转移潜能HCC细胞侵袭能力的影响并探讨其机制。
方法收集4种不同转移潜能肝癌MHCC97H、MHCC97L、SMMC7721、Hep3B细胞上清液和46例HCC患者血浆,提取、纯化和鉴定外泌体,与低侵袭潜能Hep3B细胞共培养,应用侵袭实验检测Hep3B细胞侵袭能力变化、聚合酶链反应检测环状RNA(circRNA)_100338变化及明胶酶谱实验检测基质金属蛋白酶(MMP)活性变化。
结果成功提取、纯化和鉴定相应外泌体。肺转移患者的HCC外泌体中circRNA_100338水平(0.064±0.006)高于无肺转移患者的HCC外泌体中circRNA_100338水平(0.039±0.005),高转移潜能MHCC97H细胞外泌体circRNA_100338水平(0.083±0.005)高于低转移潜能Hep3B细胞外泌体circRNA_100338水平(0.021±0.003),MHCC97H细胞外泌体共培养Hep3B细胞,可见Hep3B细胞侵袭性能力增强,穿膜数增加(15.3±2.5比8.7±2.1),共培养组细胞circRNA_100338水平升高(0.019±0.002比0.007±0.001);MMP-9活性逐渐增强(0.062±0.001、0.147±0.002、0.315±0.003),差异均有统计学意义(P<0.05)。
结论高转移潜能细胞外泌体促进HCC侵袭能力与外泌体circRNA_100338水平提高及MMP-9活性增强有关。