【摘 要】
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多数分子诊断方法对靶基因的检测都是以单链DNA为基础的,如何获得大量和高质量的单链靶DNA分子一直是研究热点.以包含BRCA1基因上3个单核苷酸多态性（SNP）的DNA片段为研究对象,
【机 构】
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华侨大学生物医学学院分子药物研究院,南京军区南京总医院药理科,中国药科大学药物分析教研室
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多数分子诊断方法对靶基因的检测都是以单链DNA为基础的,如何获得大量和高质量的单链靶DNA分子一直是研究热点.以包含BRCA1基因上3个单核苷酸多态性（SNP）的DNA片段为研究对象,通过调整不对称扩增引物碱基序列组成（5′-端引入错配或加入锁核苷酸（locked nucleic acid,LNA））,使用相差10倍浓度来增加不对称引物间Tm值差异,改进扩增条件（添加增强剂的扩增缓冲液,不同退火温度的二阶循环扩增程序）后,进行不对称扩增来产生大量单链靶DNA产物.结果表明Tm差异型不对称PCR（Tm di
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