【摘 要】
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目的构建编码HIV-1外膜糖蛋白的gp120和gp41基因杆状病毒转移载体,并在昆虫细胞中表达gp120和gp41重组蛋白.方法从HIV-1基因克隆PNL4-3(NY5/LAV)中应用聚合链反应扩增目的基
【机 构】
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中山大学附属第三医院检验科,中山大学附属第三医院内科
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目的构建编码HIV-1外膜糖蛋白的gp120和gp41基因杆状病毒转移载体,并在昆虫细胞中表达gp120和gp41重组蛋白.方法从HIV-1基因克隆PNL4-3(NY5/LAV)中应用聚合链反应扩增目的基因gp120和gp41,克隆到PGEM-T载体中 ,限制性内切酶酶切、DNA序列分析鉴定目的基因,再经EcoRⅠ和BamHⅠ双酶切后定向克隆到杆状病毒转移载体PACSecG2T中,再次测序鉴定.通过在sf9昆虫细胞中同源重组、空斑筛选、病毒鉴定、SDS-PAGE、Western-blot对重组病毒和重组蛋
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