【摘 要】
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目的 建立定量检测白喉-破伤风-无细胞百日咳疫苗生产过程中黏着素(pertactin,Prn)的方法.方法 纯化的Prn免疫家兔以制备高效价血清抗Prn抗体.辛酸-硫酸铵沉淀法纯化抗Prn多克隆抗体并进行辣根过氧化物酶标记,建立双抗体夹心ELISA法.结果 建立的方法与丝状血凝素和百日咳毒素无交叉反应,特异性较好.该ELISA法在1.25 ～ 80.00μg/L Prn测量区间有最佳线性,相关系数
【机 构】
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100024北京天坛生物制品股份有限公司细菌性疫苗研究室,100024北京天坛生物制品股份有限公司细菌性疫苗研究室,100024北京天坛生物制品股份有限公司细菌性疫苗研究室,100024北京天坛生物制
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目的 建立定量检测白喉-破伤风-无细胞百日咳疫苗生产过程中黏着素(pertactin,Prn)的方法.方法 纯化的Prn免疫家兔以制备高效价血清抗Prn抗体.辛酸-硫酸铵沉淀法纯化抗Prn多克隆抗体并进行辣根过氧化物酶标记,建立双抗体夹心ELISA法.结果 建立的方法与丝状血凝素和百日咳毒素无交叉反应,特异性较好.该ELISA法在1.25 ～ 80.00μg/L Prn测量区间有最佳线性,相关系数＞0.99.实验内和实验间检测64.0、32.0、16.0 μg/L Prn,变异系数为2.6％～7.7％,回收率为84.9％～ 95.5％,精密度和准确度均符合常规质控要求,因此该法的定量限度为16.0 μg/L.结论 建立的ELISA法可有效检测百日咳疫苗纯化过程中的Prn含量,为组分百日咳疫苗质量控制奠定了重要基础。
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