【摘 要】
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目的获得中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(NGAL)的单克隆抗体,并对其应用于化学发光定量试剂进行研究。方法利用原核表达系统表达的NGAL重组抗原,经过Ni2+-金属螯合层析纯化后
【机 构】
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厦门大学分子疫苗学与分子诊断学国家重点实验室公共卫生学院,厦门大学国家传染病诊断试剂与疫苗工程技术研究中心生命科学学院,厦门万泰凯瑞生物技术有限公司
【基金项目】
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国家高技术研究发展计划(863计划,2011AA02A101)
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目的获得中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(NGAL)的单克隆抗体,并对其应用于化学发光定量试剂进行研究。方法利用原核表达系统表达的NGAL重组抗原,经过Ni2+-金属螯合层析纯化后用于免疫6~8周龄的雌性BALB/c小鼠,完成免疫程序后将其脾脏细胞与杂交瘤细胞进行融合,通过间接法ELISA筛选抗NGAL的单克隆抗体,并结合Western blot鉴定抗体与天然NGAL的反应性。结果获得了由原核表达系统表达的NGAL重组抗原,具有较高的纯度,可形成二硫键交联的二聚体形式;重组抗原具有较好的免疫原性,免疫小鼠
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