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目的研究药物致RBL-2H3细胞脱颗粒的最佳试验条件,选用阳性反应药物对其适用性进行考察。方法以不同密度种植细胞连续培养,采用MTT法寻找细胞最佳状态的时间点及种植密度;以C48/80为工具药物,对药物与细胞作用的最佳反应体系进行比较,并考察药物作用下RBL-2H3细胞脱颗粒的"量-时-效"变化,确定最佳反应体系及最佳给药量和作用时间。在此基础上,选用有文献报道的类过敏阳性反应药物Tween80、内毒素、中华眼镜蛇毒素、天花粉蛋白注射液对方法的适用性进行考察。结果以0.5×105和1.0×105 ml-1密度对RBL-2H3细胞种植后进行连续培养,0～3 d细胞处于对数生长期;以高钙离子台式液、台式液、无酚红DMEM液作为细胞与药物作用的媒介,在同等浓度C48/80作用下,其β-己糖苷酶释放率:无酚红DMEM>台氏液>高钙离子台氏液。以不同浓度C48/80与RBL-2H3细胞分别作用15,30,60和120min,同一C48/80浓度,细胞上清β-己糖苷酶释放率随作用时间延长而提高;同一时间点,细胞脱颗粒率随C48/80浓度升高而增大,C48/80致RBL-2H3细胞脱颗粒具有良好的"量-时-效"关系。阳性反应药物Tween80在0.25%浓度即可使细胞上清β-己糖苷酶、组胺浓度明显升高,且随浓度增大脱颗粒率增加;内毒素25,50和100μg.ml-1浓度上清指标β-己糖苷酶、组胺浓度均无显著升高;中华眼镜蛇毒素1,5和25μg.ml-1浓度均可使上清β-己糖苷酶明显升高,但只有25μg.ml-1浓度可使组胺释放显著增加;天花粉蛋白注射液6,12和50μg.ml-1浓度上清指标β-己糖苷酶、组胺浓度均无升高。结果显示,RBL-2H3细胞作为药物类过敏反应体外检测模型,其最佳种植密度为0.5～1.0×105 ml-1,最佳培养时间为24 h。C48/80致RBL-2H3细胞脱颗粒试验以25～50μg.ml-1浓度反应30 min为优选条件;与台氏液及含高钙离子台氏液相比,无酚红DMEM液可提高C48/80诱导RBL-2H3细胞脱颗粒敏感性;C48/80、Tween80均具有致RBL-2H3细胞脱颗粒作用,可使细胞上清β-己糖苷酶、组胺浓度明显升高,并呈现良好的"量-时-效"关系,可作为RBL-2H3细胞脱颗粒阳性药物。内毒素、天花粉蛋白注射液均未见明显的致RBL-2H3细胞脱颗粒作用。结论 RBL-2H3细胞试验作为药物类过敏反应检测方法具有方法简便、快速、灵敏等特点,适用于批量样品的初步筛选,但因某些药物反应的作用浓度比体内实际浓度高而易出现假阳性反应,因此对于检测类过敏反应为阳性的受试物还得用整体方法作进一步评判。