研制基于上转发光免疫层析技术(UPT-LF)检测鼠疫耶尔森菌(简称鼠疫菌)、炭疽杆菌芽孢、布鲁菌的试纸，与BioThreat Alert®免疫层析(BTA)试纸的检测和操作性能进行对比。
方法以上转发光纳米颗粒作为生物示踪物，采用双抗体夹心模式分别研制检测鼠疫菌、炭疽杆菌芽孢、布鲁菌的UPT-LF试纸。分别配制1010、109、108、107、106、105、0 CFU/ml系列浓度的鼠疫菌、炭疽杆菌芽孢、布鲁菌标准品以及109 CFU/ml系列浓度的27种特异性评价菌株菌液，采用UPT-LF试纸对其进行检测，对3种UPT-LF试纸的敏感性、精密性、线性和特异性进行分析评价。配制模拟阳性样品，分别采用UPT-LF和BTA试纸对107、106、105、0 CFU/ml系列浓度的标准品以及模拟阳性样品进行检测，比较UPT-LF和BTA试纸的检测时间、敏感性以及鼠疫菌、炭疽杆菌芽孢、布鲁菌的检出率。
结果鼠疫菌UPT-LF、炭疽杆菌芽孢UPT-LF、布鲁菌UPT-LF试纸的敏感性均达到105 CFU/ml，各系列浓度检测带信号/质控带信号(T/C)值的变异系数均≤15%，lg[T/C值–临界值(cut-off值)]与lg(标准品浓度)的相关系数分别为0.996、0.998、0.999(F＝1 647.57、743.51、1 822.17，P值均<0.001)。鼠疫菌UPT-LF和布鲁菌UPT-LF试纸检测特异性评价菌株时，均无非特异性交叉反应，炭疽杆菌芽孢UPT-LF试纸检测枯草芽孢杆菌分离株2#芽孢、蜡样芽孢杆菌分离株1#芽孢存在非特异交叉反应，检测其他特异性评价菌株均无非特异性交叉反应。UPT-LF试纸检测鼠疫菌、炭疽杆菌芽孢、布鲁菌样品的时间分别为33、36、37 min，BTA为115、115、111 min；UPT-LF和BTA试纸检测0 CFU/ml标准品的阴性率均为5/5；UPT-LF试纸检测炭疽杆菌芽孢、鼠疫菌、布鲁菌的敏感性均达到105 CFU/ml，BTA试纸分别为106、106、105 CFU/ml；模拟样品检测中，UPT-LF试纸炭疽杆菌芽孢、鼠疫菌、布鲁菌的检出率均为16/16，BTA试纸分别为7/16、16/16、16/16。
结论UPT-LF试纸检测鼠疫菌、炭疽杆菌芽孢、布鲁菌的敏感性较高，特异性、线性和精密性较佳，检测和操作性能较BTA试纸更为优良。