草鱼促性腺激素基因的原核表达及多克隆抗体的制备

来源 :生命科学研究 | 被引量 : 0次 | 上传用户:herozds2009
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选用原核表达载体pGEX-4T-1,分别插入草鱼GTH和FSHβ的cDNA序列,构建成N端含有GST融合蛋白标签的表达质粒。分别转化大肠杆菌BL21(DE3),在IPTG诱导下表达出2个融合蛋白,SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳显示重组融合蛋白GST—CTHoL和GST—FSHβ的相对分子质量大约为35、38kD.用抗GST标签的单克隆抗体分别对2个表达蛋白进行Westernblot鉴定,结果显示重组蛋白表达正确.利用制备型SDS—PAGE纯化回收的蛋白并免疫新西兰大白兔,分别制备了抗GTH和抗VSHβ的具有较
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