【摘 要】
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背景与目的:分离培养高纯度的大鼠睾丸支持细胞。材料与方法:选用SD雄性大鼠(l8~21d),处死取出睾丸,采用0.25%胰蛋白酶、0.05%胶原酶二步酶消化法结合低速离心分离支持细胞,
【机 构】
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第三军医大学军事预防医学院军事毒理学教研室,第三军医大学军事预防医学院环境卫生学教研室
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背景与目的:分离培养高纯度的大鼠睾丸支持细胞。材料与方法:选用SD雄性大鼠(l8~21d),处死取出睾丸,采用0.25%胰蛋白酶、0.05%胶原酶二步酶消化法结合低速离心分离支持细胞,置于35℃,5%CO2的培养箱培养,48h后用20mmol/LTris-HCl低渗处理培养细胞。0.25%胰蛋白酶消化后二次贴壁培养,用油红O染色和透射电镜观察对所培养的支持细胞进行鉴定,并用MTT法绘制细胞生长曲线。结果:分离培养的支持细胞纯度达95%,体外培养的对数生长期为4~9d。结论:采用二步酶消化法与低速离心及低渗处理法分离培养的支持细胞纯度高,用油红O染色鉴定支持细胞是一种简便快速的方法。
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