反义寡核苷酸抑制Survivin基因表达对移植静脉内膜增生的影响

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目的研究反义寡脱氧核苷酸(ASODN)抑制Survivin基因表达对移植静脉内膜增生的抑制作用。方法 Wistar大鼠60只,建立自体静脉移植模型,术后随机分为:对照组、Survivin A- SODN 50、200μg组、正义对照组、Lipofectin+pluronic等五个组,施加不同的处理因素,在移植后1、 2周取材。组织形态学方法比较内膜增生程度,逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测Survivin基因的mRNA表达,Western blot检测Survivin基因的蛋白产物表达,免疫组织化学方法检测Survivin 及增殖细胞核抗原(PCNA)的表达,脱氧核苷酸转移酶末端标记法(TUNEL)检测血管平滑肌细胞 (VSMC)凋亡的变化。结果移植后1、2周内膜增生明显,局部转染50μg Survivin ASODN组内膜增生明显受抑制(P<0.05),200μg组受抑制程度更为明显(P<0.05);与对照组相比,Survivin A- SODN组Survivin的mRNA及蛋白产物表达显著减少(P<0.05),PCNA阳性表达同时减少,而 TUNEL阳性细胞却明显增加。结论 Survivin ASODN可显著抑制移植静脉的内膜增生,其作用可能是通过抑制Survivin基因及其蛋白产物表达,从而抑制VSMC增殖、促进其凋亡而实现的。
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