【摘 要】
：
目的体外制备弓形虫肌动蛋白(actin)及其多克隆抗体。方法以弓形虫cDNA链为模板,PCR扩增actin基因,亚克隆至pET30a载体,转化到大肠埃希菌BL21中;异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IP
【机 构】
：
新乡医学院药理学教研室,新乡医学院寄生虫学教研室,
论文部分内容阅读
目的体外制备弓形虫肌动蛋白(actin)及其多克隆抗体。方法以弓形虫cDNA链为模板,PCR扩增actin基因,亚克隆至pET30a载体,转化到大肠埃希菌BL21中;异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达actin-His6蛋白;用纯化的蛋白加免疫佐剂免疫SD大鼠,收集抗血清,制备多克隆抗体,抗体亲和纯化柱纯化并分析抗体的效价。结果 actin基因的PCR扩增产物经1.0%琼脂糖凝胶电泳,结果显示,在1 000 bp附近有一条带,与目的基因(actin cDNA长度为1 131 bp)大小相符;actin/pET30a重组质粒经BamHI和XhoI双酶切,1.0%琼脂糖凝胶电泳分析酶切产物,在1 000和5 000 bp附近可见条带;actin-His6蛋白在3～4 h时表达量达到峰值;蛋白可溶性分析显示,actin-His6蛋白主要以包涵体的形式存在;获得了抗actin-His6蛋白的大鼠源性抗血清。结论弓形虫actin蛋白在原核系统中得到了表达,用该蛋白免疫动物后获得了抗血清。
其他文献
请下载后查看，本文暂不支持在线获取查看简介。
Please download to view, this article does not support online access to view profile.
请下载后查看，本文暂不支持在线获取查看简介。
Please download to view, this article does not support online access to view profile.
单晚秧苗期病虫草害的防治应注意四点:1.种子消毒和拌种处理播前做好水稻种子消毒和药剂拌种下田,能有效控制和减少水稻恶苗病、干尖线虫病、南方水稻黑条矮缩病、蓟马、稻虱
春节前夕,一百八十余名来自国内十七个省市和港、澳地区以及新加坡、美国等地的优秀选手,在专业和业余两个系列的比赛中,经过四天两轮的紧张角逐,最后各组以分值高低评出第一
A new typed hydraulic system of electro hydraulic hammer is researched and developed By means of power bond graphs the modeling and simulation to the dynamic
随着高校辅导员队伍中呈现出人员流动性强、工作中消极应对、情绪波动大等现象,职业倦怠问题越来越得到各方面的重视并有了一定的应对措施.高校辅导员若能从自身真正认识到职
水中臭氧浓度的测定已有许多报道,如碘量法,直接紫外吸收法,丁香醛连氮法,电化学分析法等.这些方法在应用中都存在一定的局限性,尤其在浓度较低时,或受灵敏度限制或因干扰物
目的:观察大鼠脊髓胸段(T8-T10)平面中少突胶质细胞在白质和灰质中分布和形态学差异。方法:应用免疫荧光组织化学方法,利用少突胶质细胞特异性标志物-抗大鼠Nogo-A分子单克隆