【摘 要】
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目的：克隆并表达牛奶中主要过敏原αs1-酪蛋白的全长及N端、C端两个片段区基因,用于筛选与制备牛奶主要过敏原的单克隆抗体。方法：利用RT-PCR技术克隆αs1-酪蛋白基因,测序后将
【机 构】
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郑州大学公共卫生学院流行病学教研室,同时就职于郑州大学公共卫生学院流行病学教研室和深圳大学医学院,深圳大学医学院
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目的：克隆并表达牛奶中主要过敏原αs1-酪蛋白的全长及N端、C端两个片段区基因,用于筛选与制备牛奶主要过敏原的单克隆抗体。方法：利用RT-PCR技术克隆αs1-酪蛋白基因,测序后将目的片段克隆入原核表达质粒pET载体,转化至大肠杆菌（E.coli）BL21（DE3）。经IPTG诱导表达,获得重组αs1-酪蛋白。用Ni2＋亲和层析柱纯化,用Western blot和ELISA检测重组蛋白与牛奶过敏患者血清IgE的结合活性。结果：克隆获得αs1-酪蛋白全长的开放阅读框基因为645bp（含终止密码子）,编码21
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