lyGDI在HeLa细胞中的表达与辐射增敏研究

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目的 将lyGDI和突变体D19lyGDI转入到不含内源性lyGDI的HeLa细胞中,探讨其是否有凋亡信号转导功能,并分析lyGDI的导入表达能否增加辐射诱导HeLa凋亡的敏感性.方法 用脂质体转染的方法将构建于Pcdna3.1 His A载体上全长的LyGDI和D19lyGDI转入HeLa细胞,用Western blot检测LyGDI的表达和Xpress标记物,同时,用细胞流式仪和Annexin V-FITC双染色检测HeLa细胞瞬时转染诱导的细胞凋亡.用G418筛选稳定表达LyGDI的克隆,经12 Gy的60Co γ射线辐射处理,Western blot分析Caspase-3的活性及克隆形成试验来观察LyGDI的导入是否增加HeLa细胞的放射敏感性.结论 IyGDI在HeLa细胞中的瞬时表达诱导了细胞的凋亡,LyGDI具有凋亡信号转导功能.其次,Western blot检测Caspase-3和克隆形成试验的结果表明LyGDI的导入增加了HeLa细胞辐射凋亡的敏感性。

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