【摘 要】
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为研究miR-3619-5p和6磷酸果糖2激酶/果糖-2,6-二磷酸酶3(6-phosphofructo-2-kinase/fructose-2,6-biphosphatase 3,PFKFB3)对结肠癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响,采用qRT-PCR检测35例结肠癌组织和癌旁组织中miR-3619-5p和PFKFB3 mRNA的水平.在结肠癌细胞HCT116中转染miR-3619-5p模拟物或si-PFKFB3,以过表达miR-3619-5p或抑制PFKFB3.在结肠癌细胞HCT116中转染miR-361
【机 构】
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商丘市第一人民医院肿瘤一科,商丘476100
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为研究miR-3619-5p和6磷酸果糖2激酶/果糖-2,6-二磷酸酶3(6-phosphofructo-2-kinase/fructose-2,6-biphosphatase 3,PFKFB3)对结肠癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响,采用qRT-PCR检测35例结肠癌组织和癌旁组织中miR-3619-5p和PFKFB3 mRNA的水平.在结肠癌细胞HCT116中转染miR-3619-5p模拟物或si-PFKFB3,以过表达miR-3619-5p或抑制PFKFB3.在结肠癌细胞HCT116中转染miR-3619-5p模拟物和PFKFB3过表达载体(pcDNA-PFKFB3),同时过表达miR-3619-5p和PFKFB3.采用CCK-8试验和Transwell试验分别检测结肠癌细胞HCT116增殖、迁移和侵袭能力,Western blotting检测细胞中PFKFB3、细胞周期蛋白D1 (Cyclin D1)、p21、基质金属蛋白酶2(matrix metalloprotease 2,MMP-2)和基质金属蛋白酶9(matrix metalloprotease 9,MMP-9)蛋白水平,双荧光素酶报告系统验证miR-3619-5p与PFKFB3的靶向关系.结果 显示,与癌旁组织比较,结肠癌组织中miR-3619-5p水平显著降低(P＜0.05),PFKFB3 mRNA和蛋白水平显著升高(P＜0.05);过表达miR-3619-5p或抑制PFKFB3均可降低Cyclin D1、MMP-2和MMP-9蛋白表达量,提高p21表达量,降低细胞光密度(D)值、迁移和侵袭细胞数;miR-3619-5p靶向负调控PFKFB3的表达;过表达PFKFB3可逆转miR-3619-5p过表达对HCT116细胞增殖、侵袭和迁移的影响.该研究提示,miR-3619-5p可通过靶向PFKFB3抑制HCT116细胞的增殖、迁移和侵袭,miR-3619-5p可能是结肠癌治疗的潜在分子靶点.
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