钝顶螺旋藻表达载体p215t—spp的构建及转化

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用合适的限制性内切酶消化载体p215t,胶回收获得含有诉基因及amp基因大片段。设计引物,采用PCR扩增无菌钝顶螺旋藻A9藻株的强启动子片段;在T4连接酶的作用下进行体外连接重组,构建了带有螺旋藻启动子和gfp报告基因的新型表达载体p215t—spp。将该载体转入钝顶螺旋藻,利用报告基因的表达,在荧光显微镜下观察并记录转化藻细胞,p215t—spp质粒显著提高转化率。研究了不同PEG浓度、转化时间及冰浴处理对转化率的影响。采用1%PEG能有效促进细胞吸收DNA,获得10.5%。的转化率。实验初步证明,带有
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