【摘 要】
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为了建立一种高效快捷的大肠杆菌(Escherichia coli)电转化方案,采用类似密度梯度离心的方法,使用角转子离心机达到快速除盐的目的。研究发现,以20%甘油(V/V)/1.5%甘露醇(m/V
【机 构】
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湖北工业大学生物工程与食品学院,武汉科诺生物科技股份有限公司
【基金项目】
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国家“十二五”支撑计划项目(2012BAD27B03),山东技术创新计划项目(201720311004)
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为了建立一种高效快捷的大肠杆菌(Escherichia coli)电转化方案,采用类似密度梯度离心的方法,使用角转子离心机达到快速除盐的目的。研究发现,以20%甘油(V/V)/1.5%甘露醇(m/V)溶液作为梯度介质,采用菌悬液与梯度介质比例为1∶5(V/V)时形成的密度梯度可有效地进行离心除盐,离心后的细胞以20%甘油(V/V)/1.5%甘露醇(m/V)溶液重悬,随后在电场强度为15 kV/cm的条件下进行电转化能得到较高的转化效率,而在室温条件下进行电转化试验不能提高转化效率。本研究仅通过2次离心,电
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