目的:建立HPLC法测定蛇床子中3种香豆素类成分的含量。方法:采用HPLC法对蛇床子中蛇床子素、欧芹属素乙、佛手柑内酯进行含量测定。色谱条件:Extend-C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相:乙腈-水,梯度洗脱;流速:0.8 m L/min;检测波长:320 nm;柱温:35℃。结果:蛇床子素、欧芹属素乙、佛手柑内酯3种香豆素质量浓度分别在0.0513~1.025 mg/m L、0.0051~0.1026 mg/m L、0.0057~0.1148 mg/m L范围内与峰面积呈良好的线性关系,加样回收率分别为101.39%、102.85%、97.12%。浙江、江苏及上海产蛇床子中蛇床子素含量较高,其次是欧芹属素乙,佛手柑内酯含量较少;陕西及河北产的蛇床子中含有少量欧芹属素乙,蛇床子素及佛手柑内酯含量极少。结论:该方法简便可行、重复性好,可用于测定蛇床子中的香豆素类成分。