【摘 要】
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摘要：2012年秋季，在山东泰安番茄主要种植区中采集到叶片褪绿，叶脉颜色变深的疑似番茄褪绿病毒病和番茄侵染性褪绿病毒病的番茄样品。利用番茄褪绿病毒（Tomato chlorosis virus， ToCV）的特异引物 ToCV1/ToCV2和番茄侵染性褪绿病毒（Tomato infectious chlorosis virus， TICV）的特异引物TICV1/TICV2分别对样品进行扩增，最后仅
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摘要：2012年秋季，在山东泰安番茄主要种植区中采集到叶片褪绿，叶脉颜色变深的疑似番茄褪绿病毒病和番茄侵染性褪绿病毒病的番茄样品。利用番茄褪绿病毒（Tomato chlorosis virus， ToCV）的特异引物 ToCV1/ToCV2和番茄侵染性褪绿病毒（Tomato infectious chlorosis virus， TICV）的特异引物TICV1/TICV2分别对样品进行扩增，最后仅得到利用引物 ToCV1/ToCV2 扩增的101 bp 的核苷酸序列，对该核苷酸序列克隆并测序。序列比对表明，山东泰安地区分离物与已登录的番茄褪绿病毒（ToCV）分离物相似性都在99%以上。随后，对山东泰安种植区ToCV番茄分离物进行外壳蛋白（CP）及热激蛋白（HSP70）序列的扩增、克隆和测序（GenBank登录号KC812620/KC812625），经NCBI BLAST比对发现，目的序列与番茄褪绿病毒日本番茄分离物ToCVJapan/Tochigi（GenBank登录号AB513442/AB513443）相似性最高为99%，同属于毛型病毒属的番茄褪绿病毒，这是首次明确山东地区番茄受到番茄褪绿病毒的侵染。
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1.2.2 PCR产物回收与测序
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在采集样品过程中，观察到大量烟粉虱聚集在样品叶片上，因此，我们认为侵染山东番茄的番茄褪绿病毒有可能是通过烟粉虱或种苗调运传播到山东各地区番茄上的。近年来，山东烟粉虱的发生加剧，使得番茄褪绿病毒快速传播并在番茄植株上造成严重危害，番茄、甜椒等果蔬作物的产量大大减少，因此对该病毒的检测及烟粉虱的控制需引起相关部门的高度重视。
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