玉米赤霉烯酮对大鼠睾丸支持细胞乳酸产生及相关蛋白表达的影响

来源 :南京农业大学学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:bn1984
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(目的)为了探讨玉米赤霉烯酮(zearalenone,ZEA)对睾丸支持细胞(Sertoli cells,SCs)乳酸产生的影响,(方法)实验以Wistar大鼠睾丸支持细胞为研究材料,采用不同浓度的ZEA(0、0.1、1、10、20、30μmol·L-1)处理24 h,利用乳酸脱氢酶释放检测试剂盒(LDH Release Assay Kit)检测ZEA对SCs的毒性作用;乳酸(Lactic Acid LD Kit)测试盒检测了ZEA对SCs内外乳酸产生的影响;丙酮酸测试盒检测ZEA对SCs内丙酮酸产生的影响;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测SCs乳酸代谢通路相关蛋白表达的变化;免疫荧光法检测乳酸产生关键蛋白LDHA的荧光强度的改变。(结果)结果显示,随着ZEA浓度的增加,ZEA对SCs的细胞毒性逐渐增大(P<0.01);与对照组相比,染毒组细胞内外乳酸含量和细胞内的丙酮酸含量显著或极显著下降(P<0.05或P<0.01),葡萄糖跨膜转运蛋白1(GLUT1)和乳酸脱氢酶(LDHA)在1μmol·L-1及以上浓度ZEA染毒组的蛋白表达量呈极显著降低(P<0.01);单羧酸转运蛋白4(MCT4)在30μmol·L-1ZEA染毒组的蛋白表达量呈极显著性降低(P<0.05);免疫荧光检测结果表明,LDHA的荧光强度随着染毒浓度增加而降低,与对照组相比,10μmol·L-1及以上浓度ZEA染毒组细胞内的蛋白表达量均呈极显著下降(P<0.01)。(结论)ZEA可以抑制SCs乳酸产生,干扰SCs对生殖细胞的能量供应,进而对雄性生殖功能产生损伤。
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