【摘 要】
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目的构建含人纤溶酶原K5区基因的真核表达载体,转染人乳腺癌细胞株MDA-MB-231,观察阳性克隆表达的K5蛋白对人脐静脉内皮细胞株ECV304和MDA-MB-231细胞增殖的影响.方法应用PCR
【机 构】
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复旦大学上海医学院细胞与遗传学系-教育部分子医学重点实验室
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目的构建含人纤溶酶原K5区基因的真核表达载体,转染人乳腺癌细胞株MDA-MB-231,观察阳性克隆表达的K5蛋白对人脐静脉内皮细胞株ECV304和MDA-MB-231细胞增殖的影响.方法应用PCR将人纤溶酶原信号肽序列引入K5 cDNA,所得的目的片段与真核表达载体pcDNA3重组,构建重组质粒pcDNA3K5,脂质体法将其转染MDA-MB-231,G418筛选阳性克隆,PCR鉴定,RT-PCR和Western blot检测K5的表达.将鉴定正确的阳性克隆的培养上清作用于ECV304细胞,MTT法检测其增
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