【摘 要】
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目的:将南极假丝酵母脂肪酶B(CALB)通过α凝集素3’末端功能区域展示在毕赤酵母表面.方法:采用PCR方法扩增得到CALB成熟肽编码基因,将其连接到α凝集素3’末端的上游再与穿梭
【机 构】
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聊城大学生命科学学院,肇庆学院生命科学学院
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目的:将南极假丝酵母脂肪酶B(CALB)通过α凝集素3’末端功能区域展示在毕赤酵母表面.方法:采用PCR方法扩增得到CALB成熟肽编码基因,将其连接到α凝集素3’末端的上游再与穿梭载体pPIC9K连接,构建表面展示载体p KNSCALB.检测其水解活力和相关酶学性质.结果:展示CALB的毕赤酵母在甲醇的诱导下,表现出水解活性,最高可达382 U/g干细胞.对展示CALB的酶学性质研究表明:其最适温度为45℃,最适pH为8.0,60℃水浴4h后残留酶活力高于最大酶活力的50％,其水解对硝基苯酚丁酸酯的酶活力最高.结论:利用α凝集素成功将CALB展示于毕赤酵母表面,酶活力有较大提高.
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