【摘 要】
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目的 观察胰岛素样生长因子结合蛋白-3(IGFBP-3)介导线粒体途径致软骨细胞凋亡机制及吡咯喹啉醌(PQQ)的保护作用.方法 不同浓度IGFBP-3或PQQ对SD乳鼠膝软骨细胞干预处理.A组
【机 构】
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430060,武汉大学人民医院骨科
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目的 观察胰岛素样生长因子结合蛋白-3(IGFBP-3)介导线粒体途径致软骨细胞凋亡机制及吡咯喹啉醌(PQQ)的保护作用.方法 不同浓度IGFBP-3或PQQ对SD乳鼠膝软骨细胞干预处理.A组为对照组;B、C、D组分别加0.5、1.0、2.0 mg/L IGFBP-3;E组:2.0 mg/L IGFBP-3+100 nmol/L PQQ.透射电镜观察线粒体超微结构,测量线粒体体密度(Vv)、表面积密度(Sv)及数密度(Nv).荧光显微镜观察线粒体膜电位.流式细胞仪检测各组细胞凋亡率.结果 透射电镜观察线粒体见A组结构正常,B、C、D组出现肿胀受损表现,E组出现局灶性空泡,但较D组明显减少.Vv、Sv和Nv发生相应改变,差异有统计学意义(P＜0.05).荧光显微镜下A组呈橘红色荧光;B、C组既呈橘红色也呈绿色荧光;D组80％以上呈绿色荧光;E组可见橘红色和绿色两种荧光.A～E组橘红色荧光百分率分别为(89.7±3.4)％、(61.1±2.7)％、(46.4±3.1)％、(15.3±4.2)％和(57.8±3.4)％.细胞凋亡率A组为(2.67±0.29)％,B、C、D组分别为(7.91±0.41)％、(12.33±1.71)％和(19.56±2.62)％,与A组比较,差异有统计学意义(P＜0.05);E组为(9.14±1.83)％,与D组比较差异有统计学意义(P＜0.05).结论 IGFBP-3可通过线粒体途径,造成线粒体形态和功能改变,最终导致软骨细胞凋亡;而PQQ对软骨细胞线粒体具有保护作用.
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