大鼠γ-干扰素诱导蛋白-10在大肠杆菌中的表达和鉴定

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【摘要】

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目的原核表达大鼠γ-干扰素诱导蛋白-10，并对其进行鉴定。方法从大鼠脾细胞中提取RNA，用RT-PCR方法得到IP-10cDNA，双酶切将其插入pET-32a（＋）载体中。重组质粒pET-32a（＋）-IP-10经酶切

【作者】

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代吕霞祁志荣李明远蒋中华张林李虹

【机构】

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四川大学基础医学与法医学院微生物实验室,四川大学华西人类疾病生物治疗教育部重点实验室

【出处】

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免疫学杂志

【发表日期】

：

2006年4期

【关键词】

：

γ-干扰素诱导蛋白-10 克隆原核表达 IFN-γ inducible protein-10 Clone Prokaryotic expression

【基金项目】

：

国家自然科学基金（30470613）和教育部博士点专项基金（20040610053）资助项目

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目的原核表达大鼠γ-干扰素诱导蛋白-10，并对其进行鉴定。方法从大鼠脾细胞中提取RNA，用RT-PCR方法得到IP-10cDNA，双酶切将其插入pET-32a（＋）载体中。重组质粒pET-32a（＋）-IP-10经酶切、PCR及测序鉴定后转化大肠杆菌BL21（DE3）中进行表达。结果所获得的大鼠IP-10克隆，经测序与GenBank报道的完全一致。所表达的产物经SDS-PAGE和Westem blot分析获得证实。结论已成功构建原核表达载体pET-32a（＋）-IP-10，并使其在大肠杆菌中获得了

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