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  5. 与狂犬病病毒P 蛋白互作宿主蛋白的筛选与鉴定

与狂犬病病毒P 蛋白互作宿主蛋白的筛选与鉴定

来源 :中国预防兽医学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：gzalpha
【摘 要】
：
狂犬病病毒(RV)P蛋白是一个多功能蛋白,为了筛选与P蛋白互作的宿主蛋白,本研究克隆了RV SAD-L16株的P基因并测序分析,构建原核表达载体pET42b-P,通过双酶切鉴定后经原核系统
【作 者】
：
陈贝贝 马海 童剑军 苟涛 何川川 张雪萍 高娜 杨勇飞 李 
【机 构】
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塔里木大学动物科学学院,新疆生产建设兵团塔里木畜牧科技重点实验室
【出 处】
：
中国预防兽医学报
【发表日期】
：
2020年12期
【关键词】
：
狂犬病病毒P蛋白 原核表达 互作蛋白 噬菌体展示 筛选 Rabies virus P protein prokaryotic expression intera 
【基金项目】
：
国家自然科学基金“基于宿主范围基因ANK的山羊痘病毒跨物种感染的分子机制研究”(31760741),大学生创新创业项目(2018033)
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狂犬病病毒(RV)P蛋白是一个多功能蛋白,为了筛选与P蛋白互作的宿主蛋白,本研究克隆了RV SAD-L16株的P基因并测序分析,构建原核表达载体pET42b-P,通过双酶切鉴定后经原核系统表达P蛋白并经western blot鉴定。采用DNAStar软件分析P蛋白的二级结构。采用噬菌体展示技术从人脑组织T7噬菌体cDNA文库中筛选与P蛋白互作的宿主蛋白并经PCR、测序鉴定和BLAST比对;进一步采用ELISA验证与P蛋白互作的宿主蛋白。经测序结果显示,扩增的SAD-L16株P基因全长894 bp,编码29
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