猪链球菌Ide通用截短蛋白原核表达及纯化研究

来源 :中国兽药杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:leon_xu23
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为利用大肠埃希菌表达猪链球菌Ide通用截短蛋白,通过对GenBank公布的IdeS蛋白家族基因同源性分析,使用Primer 5.0软件设计一对特异性引物,以猪链球菌2型强毒株JZLQ全基因组为模板,采用PCR方法扩增Ide基因截短片段,经 Bam HⅠ和 Hin dⅢ双酶切后将目的片段分别克隆到pET28a、pET32a和pET-sumo表达载体上,分别转化宿主菌 E.coli BL21(DE3)。通过优化诱导温度及诱导剂IPTG浓度进行表达并对表达产物进行SDS-PAGE分析。结果显示,PCR扩增片段大
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