苦荞过敏原TBa和TBb基因的共表达及其包涵体复性的研究

来源 :中国农学通报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:lillian0606
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【研究目的】利用大肠杆菌共表达苦荞过敏蛋白的两个亚基,并对表达产物进行包涵体复性研究和免疫学活性分析;【方法】用已构建的表达质粒pET-28a-TBa和pET-32m-TBb,共转化大肠杆菌BL21(DE3)感受态,利用双抗生素筛选法,获得稳定遗传的双质粒转化子,经IPTG诱导,两个基因在同一宿主菌中共表达,在共表达产物复性过程中,两个亚基互为分子伴侣,相互促进了蛋白质的重新正确折叠;【结果】表达蛋白以包涵体的形式存在,ELISA检测表明:复性后的蛋白免疫学活性得到了提高;【结论】由此获得了有活性的蛋白质,并且建立了不相容双质粒共表达外源基因和包涵体复性的方法。
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