茜草“隐性品种”的鉴定及其质量的影响研究

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目的:采用DNA条形码技术,研究茜草药材的"隐性品种"及质量。方法:提取23份茜草饮片的DNA,对ITS、ITS2、psb A-trn H、rbc L和mat K序列扩增和测序,比较扩增测序效率,Dna SP分析变异位点和单倍型,MEGA构建系统发育树,发现茜草药材的"隐性品种",分析"隐性品种"对茜草质量的影响。结果:ITS和ITS2序列由于多拷贝和真菌污染现象,psb A-trn H序列由于高poly结构,扩增和测序成功率均较低。rbc L序列的扩增和测序效率较高,截去引物区,所得序列长度为553bp,共3个变异位点。聚类分析将所有样品分为两个分支,第一分支占73.9%,与正品茜草聚为一支;第二分支形成独立的分支,没有和正品茜草聚为一支,由于这两个分支的茜草药材性状没有明显区别,将未和正品茜草聚成一个分支的样品称为"隐性品种";第一分支的大叶茜草素和羟基茜草素含量明显高于第二分支。结论:DNA条形码可以用于中药"隐性品种"的发现,隐性品种影响药材质量,应加强对中药"隐性品种"的研究。
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