结核分枝杆菌复苏因子D的克隆及测序分析

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目的克隆结核分枝杆菌Rv2389c基因。方法常规方法提取结核分枝杆菌H37Rv基因组DNA,PCIK扩增结核分枝杆菌Rv2389c基因,经内切酶酶切、胶回收,将片段亚克隆到T载体中,转化至DH5α。以PCIK鉴定的阳性菌落转至LB中培养,菌液进行质粒提取、酶切、胶回收,回收片段再克隆至表达载体pET30a中,转化至DH5α中。PCIK阳性菌落转至LB中培养,测序确定插入片段的正确性。结果构建了Rv2389c重组表达质粒PET30a-Rv2389c。结论成功克隆了结核分枝杆菌复苏因子Rv2389c基因。
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