【摘 要】
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目的 探讨小分子核苷酸序列182(miR-182)靶向调控“叉头蛋白”的O亚家族(FOX03a)蛋白表达对胶质瘤细胞U251增殖与侵袭能力的影响。方法 将无义序列与miR-182 micmics脂质体转
【机 构】
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中国人民解放军联勤保障部队第908医院神经外科,南昌大学第二附属医院神经外科
【基金项目】
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江西省科技计划项目(编号:2010BSA12300)
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目的 探讨小分子核苷酸序列182(miR-182)靶向调控“叉头蛋白”的O亚家族(FOX03a)蛋白表达对胶质瘤细胞U251增殖与侵袭能力的影响。方法 将无义序列与miR-182 micmics脂质体转染入U251细胞内,MTT法测定细胞的增殖数量,Transwell小室测定细胞的转移。荧光素酶报告实验检测miR-182对FOX03a的靶向作用,应用Western blot与qRT-PCR测定FOX03a蛋白与mRNA的表达。将FOX03a野生型与突变型质粒导入U251细胞,应用MTT与Transwell实验测定U251细胞的增殖与转移能力变化。结果 与对照组及无义序列组比较,在第1～3天,转染miR-182micmics脂质体组的细胞数显著增加(P <0. 05);第4～5天,miR-182 micmics脂质体组的细胞数呈减小趋势,较其他两组细胞数仍显著增加(P<0.05)。荧光素酶报告实验检测显示,共转染突变型pc DNA3/EGFP(增强绿色荧光蛋白)-FOX03a 3’-UTR(非翻译区)质粒和miR-182 mimics组细胞荧光素酶活性最低(P <0. 01)。与对照组及无义序列组比较,miR-182 mimics组FOX03a的蛋白及mRNA含量显著减少(P<0.01)。转染突变型FOX03a脂质体的U251细胞,与野生型组比较,其细胞增殖数量与转移数量均显著减少(P<0. 05)。结论 miR-182可促进胶质瘤U251细胞的增殖与转移,FOX03a蛋白表达量的增加会造成胶质瘤U251细胞的增殖与转移能力降低,miR-182对FOX03a起负性调控的作用。
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