【摘 要】
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目的:探讨肝细胞表达CYP21A2对肝细胞线粒体氧化磷酸化的影响.方法:通过腺病毒转染获得稳定传代的CYP21A2HepG2细胞系,采用RNA干扰或外显子启动CYP21A2基因在HepG2细胞系中的
【机 构】
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目的:探讨肝细胞表达CYP21A2对肝细胞线粒体氧化磷酸化的影响.方法:通过腺病毒转染获得稳定传代的CYP21A2HepG2细胞系,采用RNA干扰或外显子启动CYP21A2基因在HepG2细胞系中的表达,CYP21A2低表达HepG2组对照正常HepG2组、CYP21A2高表达HepG2组对照阴性HepG2组,提取RNA,进行全基因组转录表达谱芯片检测并差异性表达分析,生物信息学分析筛选各组肝细胞线粒体呼吸链差异表达基因,实时荧光定量验证.结果:CYP21A2基因沉默和过表达HepG2细胞线粒体呼吸链关键基因Ndufa2.Ndufa3均发生表达水平的显著性改变,实时荧光定量验证结果显示:正常对照组CYP21A2的Ndufa2表达为1.008±0.141,高于CYP21A2沉默组0.678±0.211(t=2.900,p<0.05);空载对照CYP21A2的Ndufa2表达为1.023±0.238,高于CYP21A2过表达组0.645±0.133(t=3.095,p<0.05);正常对照组CYP21A2的Ndufa3表达为1.009±0.145,高于CYP21A2沉默组0.723±0.175(t=2.817,p<0.05);空载对照CYP21A2的Ndufa3表达为1.012±0.169,高于CYP21A2过表达组0.645±0.133(t=3.415,p<0.05).结论:肝细胞表达CYP21A2基因功能或参与肝细胞线粒体氧化磷酸化的个体水平控制,CYP21A2或参与人体物质能量代谢模式形成.
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