【摘 要】
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目的:探讨脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)对小鼠脑微血管内皮细胞通透性的影响及其可能的分子机制.方法:以培养至融合的小鼠脑微血管内皮细胞株bEnd.3为实验对象,利用跨内皮
【机 构】
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中南大学湘雅医院儿科,长沙,410008
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目的:探讨脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)对小鼠脑微血管内皮细胞通透性的影响及其可能的分子机制.方法:以培养至融合的小鼠脑微血管内皮细胞株bEnd.3为实验对象,利用跨内皮细胞电阻抗(transendothelial electrical resistance,TEER)检测LPS对bEnd.3细胞屏障功能的改变及C3转移酶预处理后对其的影响.Pull down法和报告基因法分别测定RhoA和NF-κB活性.直接荧光染色法观察bEnd.3细胞F-actin的分布变化.结果:LPS作用3 h后,bEnd.3细胞TEER值明显下降[(53.67±2.01) Ω·cm2],作用12 h后达最低[(37.67±3.05) Ω·cm2],3,6,12 h组与正常对照组比较差异均有统计学意义(P＜0.05).C3转移酶预处理后,LPS作用3,12 h时细胞TEER值分别为(60.67±4.05) Ω·cm2和(40.60±2.33) Ω·cm2,均比相应时间点未预处理细胞的TEER值高,差异有统计学意义(P＜0.05).LPS作用bEnd.3细胞0.5 h后RhoA明显活化,NF-κB活性增加,C3转移酶预处理后其NF-κB活性明显下降,差异有统计学意义(P＜0.05).直接荧光染色发现在LPS作用3 h后细胞出现明显的F-actin重构,其程度随LPS作用时间的延长而加重,而C3转移酶预处理细胞F-actin重构发生较晚且程度较轻.结论:LPS通过使F-actin重组增加脑微血管内皮细胞的通透性,RhoA和NF-κB均参与此过程,且NF-κB信号分子受RhoA调控.
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