【摘 要】
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基于萤火虫萤光素酶生物发光反应体系,以SpectraMaxM5酶标仪为发光强度测试设备,建立了测定化学物对萤光素酶抑制毒性的微板发光测试新方法。系统地研究了萤光素酶浓度、萤光素
【机 构】
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中国热带农业科学院分析测试中心,同济大学环境科学与工程学院
【基金项目】
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国家自然科学基金项目(20777056),国家高技术研究发展计划课题专题(2007AA062417)和农业公益性行业科研专项经费项目(201303141)资助
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基于萤火虫萤光素酶生物发光反应体系,以SpectraMaxM5酶标仪为发光强度测试设备,建立了测定化学物对萤光素酶抑制毒性的微板发光测试新方法。系统地研究了萤光素酶浓度、萤光素浓度、ATP浓度、pH、温度、反应时间等实验条件对发光强度的影响。发现ATP对发光呈现双相响应关系,最大发光度出现在ATP浓度为1.1×10μmol·L-1。应用该方法成功地测定了NaF,NaCl,KBr和NaBF4对萤光素酶的发光抑制毒性效应,基于非线性最小二乘法拟合化学物对萤光素酶毒性的剂量一效应曲线(DRC
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