PDPK1 3′UTR双荧光素酶报告载体的构建及与gga-miR-148a-5p的靶向验证

来源 :江苏农业学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：jake9

【摘要】

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本试验通过构建PDPK1基因3′UTR双荧光素酶报告载体,并验证gga-miR-148a-5p与PDPK1的靶向关系。利用生物信息学软件预测gga-miR-148a-5p与PDPK1结合位点;利用PCR扩增PDPK1基

【作者】

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余河玲朱师良何启牮王彦

【机构】

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四川农业大学畜禽遗传资源发掘与创新利用四川省重点实验室

【出处】

：

江苏农业学报

【发表日期】

：

2020年1期

【关键词】

：

PDPK1 gga-miR-148a-5p 禽白血病双荧光素酶报告基因检测系统 PDPK1gga-miR-148a-5pavian leukosisdual

【基金项目】

：

国家自然科学基金项目(31601936),四川省“十三五”育种攻关项目(2016NYZ0050)

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本试验通过构建PDPK1基因3′UTR双荧光素酶报告载体,并验证gga-miR-148a-5p与PDPK1的靶向关系。利用生物信息学软件预测gga-miR-148a-5p与PDPK1结合位点;利用PCR扩增PDPK1基因3′UTR序列,将其克隆到PGL3-CMV-LUC-MCS双荧光素酶报告基因载体中;将gga-miR-148a-5p及阴性对照分别与野生型gga-PDPK1-WT-3′UTR双荧光素酶报告质粒共转染至293T细胞中,双荧光素酶报告系统检测各组荧光素酶活性。Targetscan、miRbas

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