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目的 探讨金属蛋白酶1组织抑制剂(TIMP-1)抑制大鼠肾小球系膜细胞(RMC)凋亡与Janus激酶,信号转导和转录激活子(JAK/STAT)通路的关系.方法 用无血清培养基体外培养pcDNA3空载体、人正义、反义TIMP-1基因重组真核表达载体转染RMC.根据是否加JAK2特异性抑制剂AG490刺激24 h,将细胞分为未转染组、未转染+AG490组、空载体组、空载体+AG490组、正义组、正义+AG490组、反义组和反义+AG490组.另外设正常培养条件下的RMC作为正常对照组.应用流式细胞技术检测各组RMC的凋亡率.RT-PCR检测TIMP-1、bcl-xl、cyclin D1、p27kip1和JAK2 mRNA的表达.Western印迹检测胞质中JAK2、STAT3、STAT5及其相应磷酸化蛋白(p-JAK2、p-STAT3、p-STAT5)的表达.结果 未转染组、正义组及反义组RMC凋亡率分别为(10.59±0.96)%、(7.08±0.43)%和(21.91±0.25)%,各组间差异有统计学意义(P＜0.05或P＜0.01).在未加AG490的各组RMC中,bcl-xl和cyclin D1 mRNA在正义组中表达最高,反义组中最低,p27kip1 mRNA在反义组中表达最高.加入AG490后,各组细胞的凋亡率均显著增加(P＜0.01);TIMP-1、bcl-xl和cyclin D1 mRNA表达均减少;p27kip1 mRNA表达均增加.在未加AG490的各组细胞中,p-JAK2、p-STAT3和p-STAT5在正义组中表达最高,反义组中最低.加入AG490后上述蛋白表达均减少,且正义+AG490组最高,反义+AG490组最低.结论 TIMP-1表达受JAK/STAT信号通路调控,后者可通过上调前者的表达抑制RMC凋亡;TIMP-1通过JAK/STAT信号通路抑制RMC凋亡.bcl-xl、cyclin D1和p27kip1参与了上述过程.