目的 研究神经再生条件液(nerve regeneration conditioned fluid, NRCF)中具有神经再生趋化活性的蛋白成分,对相对分子质量为(232～440)×103的蛋白条带进一步行分离和定性.方法 新西兰大白兔6只,体重1.8～2.5 kg,取坐骨神经建立神经再生室模型.术后7 d采集NRCF进行自然聚丙烯酰胺凝胶电泳(native-polyacrylamide gel electrophoresis,Native-PAGE)分离,切取相对分子质量为(232～440)×103区域的蛋白条带,采用Shotgun蛋白质组学策略、液相色谱-串联质谱对其组分进行定性分析.结果 NRCF的Native-PAGE电泳结果显示,相对分子质量在669×103以上、(232～440)×103和(140～232)×103分别有1条蛋白带,在(67～140)×103有6条蛋白带.其中相对分子质量在(232～440)×103的蛋白条带共鉴定到54种蛋白质,主要集中在等电点5.5～8.0,相对分子质量为(10～40)×103范围内,其中4种是未命名蛋白质.这54种蛋白质可归类为结合蛋白(43%)、转运蛋白(30%)、酶(6%)、信号转导蛋白(4%)和分子功能未知(17%).54种蛋白质的亚细胞定位主要是分泌性蛋白(63%),其他的位于细胞膜和胞浆内等.结论 采用Native-PAGE和Shotgun蛋白质组学分析NRCF中相关蛋白质,确定了NRCF中相对分子质量为(232～440)×103条带的蛋白质组分,为进一步研究其中的功能未知蛋白提供了线索,对明确其是否对周围神经再生具有促进作用.