口蹄疫病毒抗原保护剂的筛选和优化

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用三因素、三水平、双重复正交试验筛选出对口蹄疫病毒(FMDV)抗原保护效果较好的4号保护剂配方,该保护剂保存的病毒在37℃静置40 h和50 h后毒价TCID50分别为4.5和2.0,而对照组病毒则分别降至1.5和0。通过方差分析4号保护剂保存病毒测得TCID50极显著的高于1、3、5、6、7、8号,显著高于2、9号。保护剂配方优化试验结果表明,加该保护剂的病毒,分别于-20℃和4℃下保存90 d、120 d、150 d,其?TCID50分别为6.0、6.0、5.8和5.3、5.0、4.5,而未加保护剂的对照病毒则为5.8、5.3、5.0和5.0、4.5、4.3;FMDV 146 s抗原含量测定结果表明,分别于-20℃和4℃下保存150 d,37℃下保存40 h,测得结果分别为1.116μg.mL-1、0.896μg.mL-1、0.888μg.mL-1,而未加保护剂的对照病毒则为0.846μg.mL-1、0.802μg.mL-1、0.307μg.mL-1;反复冻融试验表明对照组冻融6次即为临界点,病毒保护剂组达10次;通过对主要保护性抗原VP1基因,试验病毒株(O/NX/99/1)、对照病毒株(O/NX/99/2)测序比对,结果表明保护剂不会使病毒产生基因突变。试验结果说明该保护剂对FMDV有效抗原确实有较好的保护作用。
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