目的建立人附睾蛋白4(HE4)的化学发光定量检测方法,并进行方法学评价。方法血清中HE4与包被抗HE4单克隆抗体的微磁珠和辣根过氧化物酶(HRP)标记的抗HE4单克隆抗体反应形成双抗体夹心结构,HRP可催化发光底物液(含鲁米诺-H2O2-增强剂)产生大量光信号,根据光信号的量计算血清中HE4的浓度。依据国家体外诊断试剂性能评价指南性文件和美国临床和实验室标准化协会(CLSI)指南性文件,对本方法进行系统评价。结果建立的方法空白限(LoB)为1.014pmol/L、检测限(LoD)为5.252 pmol/L、定量检测限(LoQ)为10.568 pmol/L;甲胎蛋白(α-fetoprotein,AFP)≤400 IU/mL、癌胚抗原(carcinoembryonic antigen,CEA)≤1 777μg/L、糖类抗原(carbohydrate antigen,CA)125≤3 500 U/mL、CA19-9≤3 500U/mL对本方法无明显交叉反应;线性范围为20~1 700 pmol/L;在100 000 pmol/L时未出现明显钩状(Hook)效应;批内变异系数(CV)为1.5%~3.6%;日间CV为3.8%~6.4%;回收率为98.36%~99.14%;血红蛋白≤4.8 g/L、胆红素≤1 077.5μmol/L、乳糜微粒≤6 000浊度、生物素≤50μg/L、类风湿因子≤1 000 U/L对测定结果无明显影响;37℃保存7 d后相对偏差为-6.63%~10.23%;建立的方法(Y)与Fujirebio公司的ELISA试剂(X)进行方法学比对,相关曲线为Y=1.023X-12.280,r=0.989 7(P<0.01)。结论本研究建立的HE4磁微粒化学发光免疫测定法各项性能符合临床实验室需求,为卵巢癌的辅助诊断提供了有效工具。