【摘 要】
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目的：观察桑叶有效部位(总多糖、总黄酮、总生物碱)影响核因子-κB(NF-κB)通路对高胰岛素诱导人肝癌HepG2细胞胰岛素抵抗的改善作用.方法：以人肝癌HepG2细胞为研究对象,在含10mg·L－1胰岛素的培养基中培养48h,建立IR-HepG2模型;采用桑叶有效部位观察对HepG2细胞胰岛素抵抗的影响,从而确定最佳给药浓度.实验分为空白组,mg·L－1胰岛素处理组(模型组),总多糖组,总黄酮组
【机 构】
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广州军区广州总医院,广州 510010 南方医科大学,广州 510515
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目的：观察桑叶有效部位(总多糖、总黄酮、总生物碱)影响核因子-κB(NF-κB)通路对高胰岛素诱导人肝癌HepG2细胞胰岛素抵抗的改善作用.
方法：以人肝癌HepG2细胞为研究对象,在含10mg·L－1胰岛素的培养基中培养48h,建立IR-HepG2模型;采用桑叶有效部位观察对HepG2细胞胰岛素抵抗的影响,从而确定最佳给药浓度.实验分为空白组,mg·L－1胰岛素处理组(模型组),总多糖组,总黄酮组,总生物碱组,小白菊内酯组.采用葡萄糖氧化酶-过氧化物酶法(GODPOD)法检测培养液中残存葡萄糖含量,RT-qPCR法检测NF-κB,κβ激酶-β(IκKβ)及核因子κB抑制蛋白α(IκBα)mRNA的表达,WesteRn blot检测蛋白NF-κB,κKβ及IκBα的相对表达量.
结果：经桑叶有效部位改善HepG2细胞胰岛素抵抗的筛选得出各给药组最佳给药剂量分别为总多糖组、总黄酮组、总生物碱组、小白菊内酯组最佳给药质量浓度分别为200100,mg·L－1,μmol·L－1.与空白组比较,高胰岛素刺激后,NF-κB,κKβ含量明显升高(P＜0.01),NF-κB结合蛋白IκBα明显降低(P＜0.01),表明高胰岛素刺激后NF-κB通路已被部分激活;而桑叶有效部位干预后,与模型组相比,只有黄酮组NF-κB,IκKβ的含量明显降低(P＜0.05),抑制IκBα的降解(P＜0.05);多糖组和生物碱组影响作用不明显.
结论：高胰岛素诱导人肝癌HepG2细胞发生胰岛素抵抗后,NF-κB通路在一定程度上被激活,推测胰岛素抵抗与NF-κB炎症通路间存在一定的关系;而桑叶黄酮可影响NF-κB通路从而改善HepG2细胞胰岛素抵抗状态.
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