【摘 要】
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目的:探讨重组免疫毒素hdsFv-hEDN在大肠杆菌中的可溶性表达和纯化,观察其体外杀伤作用.方法:利用IPTG诱导hdsFv- hEDN免疫毒素在大肠杆菌中的表达.诱导转化菌经超声碎菌、离
【机 构】
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兰州军区乌鲁木齐总医院病理科,解放军第15医院妇产科,第四军医大学基础部病理学教研室
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目的:探讨重组免疫毒素hdsFv-hEDN在大肠杆菌中的可溶性表达和纯化,观察其体外杀伤作用.方法:利用IPTG诱导hdsFv- hEDN免疫毒素在大肠杆菌中的表达.诱导转化菌经超声碎菌、离心、Ni-NTA Agarose亲合层析等步骤纯化,并通过SDS-PAGE和Western-blot进行分析及检测.采用MTT比色法观察其对人肝癌细胞的杀伤作用.结果: IPTG诱导后,hdsFv- hEDN在大肠杆菌中获得了可溶性表达,表达量为8%.表达产物纯化后,纯度达到基本均一.MTT结果表明,其对人肝癌细胞具有
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