【关键词】舌鳞状细胞癌;单克隆抗体;移植瘤;组织学
　　【中图分类号】R782 【文献标识码】A 【文章编号】1002-8714（2019）12-0144-01
　　随着近年来对肿瘤生长的不断深入研究，发现血管生成对肿瘤生长起着至关重要的作用。肿瘤血管生成由正负两方面调节，其中血管内皮生长因子VEGF是重要的促血管生长因素。舌癌占口腔癌的首位[1]，恶性程度高、生长迅速、易较早发生转移，而转移后临床无有效的治疗方法，严重威胁患者的生命安全。现今探讨舌癌的基因治疗方法和效果已经成治疗舌癌患者领域的研究热点。本课题组初期已在临床试验方面证实VEGF单克隆抗体可显著抑制体内移植瘤的生长，现从组织学方面评价VEGF单克隆抗体治疗人舌癌细胞裸鼠移植瘤的效果。

1 材料与方法

　　1.1 材料
　　1.1.1实验动物BALB∕c 裸鼠購于北京维通利华，18±2g，4 周龄大，雄性，饲养于实验动物中心SPF级层流架环境中。
　　1.1.2主要仪器和设备 人舌癌细胞株 Tca-8113（北京大学医学部口腔医学院实验室），VEGF单克隆抗体（赛尔生物技术公司），标准小牛血清（润泰生物科技有限公司），CO2培养箱（日本三洋公司），超净工作台（青岛海尔），旋转石蜡切片机（美国Histo）。
　　1.2 方法
　　1.2.1 模型建立及实验分组：
　　将Tca-8113细胞用RPMI-1640培养，待细胞生长约达到瓶底80%，细胞处于对数生长期时，将培养瓶用 PBS 清洗三遍后用 0.25%胰蛋白酶消化，用10%小牛血清的 RPMI-1640 培养基终止消化后将细胞悬浊液转至离心管，离心，弃上清液，用生理盐水吹打细胞至单细胞悬液，计数，再用生理盐水调整，分别用皮试针头接种于裸鼠右前肢背部皮下，注射完毕后随机分为两组，每组 5 只。从移植后的第二天开始进行瘤周注射药物干预，对照组注射200μl Nacl、实验组注射 200μl VEGF单克隆抗体[2]每天一次，持续 28 天。
　　1.2.2 组织学评价
　　给药饲养28天后脱颈法处死动物，无菌条件下迅速完整剥离肿瘤组织，去净肿瘤包膜外组织后，固定于10%福尔马林固定液中，备用。固定后的组织常规石蜡包埋后，进行HE染色和VEGF免疫组织化学检测。
　　1.2.3图像结果分析方法：
　　采用Image pro plus 6.0分析系统对各组组织切片VEGF的表达强度进行半定量分析。
　　1.2.4 统计学分析：
　　使用SPSS 19.0软件对数据进行统计分析，最终结果用（-x±s）表示，数据均用t检验法，以α=0.05为检验水准，p