牛SREBP1基因shRNA序列的筛选及其腺病毒载体的构建与鉴定

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【目的】筛选可靶向干扰牛的SREBP1基因的有效shRNA,构建相应腺病毒载体并包装重组腺病毒,为在细胞水平上研究SREBP1基因的功能和作用机制提供基础。【方法】以秦川牛SREBP1基因为研究对象,首先靶向其编码区(codingsequence,CDS)序列设计并合成6条干扰和1条阴性对照shRNA,并构建表达载体pENTR—u6-shRNA。然后与载体psiCHECK-II—SREBP1共转染293A细胞,筛选有效的pENTR—u6-shRNA。其次将筛选的pENTR-u6-shRNA和阴性对照pEN
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