【摘 要】
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【目的】筛选可靶向干扰牛的SREBP1基因的有效shRNA,构建相应腺病毒载体并包装重组腺病毒,为在细胞水平上研究SREBP1基因的功能和作用机制提供基础。【方法】以秦川牛SREBP1基
【机 构】
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西北农林科技大学动物科技学院,国家肉牛改良中心
【基金项目】
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国家自然科学基金(31272411)、“十二五’’国家863计划(2011AA100307.02)、教育部“长江学者和创新团队发展计划”(IRT0940)、“十二五,,国家科技支撑计划(201IBAD28804.03)、国家转基因生物新品种培育重大专项(2011ZX08007-002)、国家肉牛牦牛产业技术体系(CARS.38)
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【目的】筛选可靶向干扰牛的SREBP1基因的有效shRNA,构建相应腺病毒载体并包装重组腺病毒,为在细胞水平上研究SREBP1基因的功能和作用机制提供基础。【方法】以秦川牛SREBP1基因为研究对象,首先靶向其编码区(codingsequence,CDS)序列设计并合成6条干扰和1条阴性对照shRNA,并构建表达载体pENTR—u6-shRNA。然后与载体psiCHECK-II—SREBP1共转染293A细胞,筛选有效的pENTR—u6-shRNA。其次将筛选的pENTR-u6-shRNA和阴性对照pEN
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