【摘 要】
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目的从生姜中提取、分离和鉴定姜酚类物质,初步研究其抗肿瘤作用的分子机制。方法采用CO2超临界流体对生姜原料进行提取,通过硅胶、RP-C18、Sephadex LH-20和HPLC等色谱方法
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目的从生姜中提取、分离和鉴定姜酚类物质,初步研究其抗肿瘤作用的分子机制。方法采用CO2超临界流体对生姜原料进行提取,通过硅胶、RP-C18、Sephadex LH-20和HPLC等色谱方法进行分离和纯化,进而借助MS和NMR等光谱方法鉴定化合物结构,然后采用MTT法检测化合物对不同肿瘤细胞活性的抑制作用,采用流式细胞术及Western blot检测其抑制肿瘤细胞活性的变化。结果从生姜中提取分离得到5个姜酚类化合物,分别为4,6,8,10-姜酚和5’-羟基-6-姜酚。其中8-姜酚和10-姜酚对多种肿瘤细胞的活性均有较好的抑制作用,尤以10-姜酚作用最强,给药72 h后其对乳腺癌MDA-MB-231、MCF-7细胞的IC50分别为（25.80±1.39）、（35.29±2.70）μmol/L。流式细胞术检测发现8-姜酚和10-姜酚可导致乳腺癌细胞的G1期阻滞,其中10-姜酚作用于MDA-MB-231和MCF-7细胞24 h后G1期细胞的百分比分别为（66.73±2.93）%、（66.59±2.49）%,相对于对照组的（47.39±1.97）%和（49.17±3.52）%,差异有统计学意义（P<0.01）。Western blot检测结果显示,8-姜酚和10-姜酚可下调MDA-MB-231和MCF-7细胞中G1期相关蛋白Cyclin D1和CDK4的表达;并可降低MAPK信号通路中ERK的磷酸化水平,增强P38的磷酸化水平。结论从生姜中提取出的8-姜酚和10-姜酚具有明显的抑制肿瘤细胞活性的作用,其机制可能与其影响MAPK通路中ERK、P38磷酸化水平,导致细胞G1期阻滞有关。
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