【摘 要】
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探讨系统性红斑狼疮(SLE)患者骨髓间充质干细胞(MSC)内ROS水平对其细胞骨架F-actin的影响及相关机制。采用免疫荧光染色法观察SLE患者MSC细胞骨架F-actin的排列;RT-PCR检测Rh
【机 构】
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南京大学医学院附属鼓楼医院风湿免疫科,南京医科大学鼓楼临床医学院,
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探讨系统性红斑狼疮(SLE)患者骨髓间充质干细胞(MSC)内ROS水平对其细胞骨架F-actin的影响及相关机制。采用免疫荧光染色法观察SLE患者MSC细胞骨架F-actin的排列;RT-PCR检测RhoA、Cdc42、Rac1的mRNA水平;western blot检测F-actin及Cdc42蛋白表达水平;流式细胞术检测胞内ROS水平;ELISA检测血清SOD水平;用20μmol/L H2O2刺激正常对照组骨髓MSC 1h,10mmol/L N-乙酰半胱氨酸(NAC)刺激SLE患者骨髓MSC 6h,观察MSC的改变。结果发现SLE患者骨髓MSC F-actin排列紊乱,其蛋白表达水平显著高于正常对照组;在基因及蛋白水平上,Cdc42表达显著高于正常对照组;SLE患者骨髓MSC胞内ROS水平显著高于正常对照组,而外周血SOD水平显著降低;外源性氧化剂H2O2使正常MSC胞内ROS水平升高,导致F-actin排列紊乱,Cdc42水平表达上升,而外源性抗氧化剂NAC使SLE MSC胞内ROS水平降低,导致F-actin排列有所恢复,并且Cdc42表达下调。以上结果表明,SLE患者清除超氧化物能力减弱,骨髓MSC胞内ROS水平升高,可能通过上调Cdc42表达水平使MSC F-actin排列紊乱,在SLE患者骨髓MSC异常的机制中可能起了重要作用。
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