抗癌胚抗原单克隆抗体可变区基因的克隆及鼠-人嵌合抗体基因在E.coli中的高效表达

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本文采用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)技术,从抗癌胚抗原(CEA)单克隆抗体杂交瘤细胞中克隆到了该抗体的重、轻链可变区(Ⅴ区)基因,并分别将其与人的恒定区基因 C、Cκ相拼接,构建鼠-人嵌合抗体基因。SDS-PAGE和Western-Blot分析结果证实嵌合重、轻链抗体基因在E.coli中得到高效表达,表达量约为菌体可溶蛋白的30%和15%。放射免疫分析法(RIA)和间接ELISA测定的结果表明嵌合重链基因表达产物具有与CEA结合的能力。
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