【摘 要】
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目的 探讨疏肝健脾方药对非酒精性脂肪性肝炎(NASH)大鼠肝细胞TLR4/p38MAPK信号通路的干预作用,从炎症角度揭示疏肝健脾方药抗大鼠NASH的作用机制.方法 选用SPF级SD大鼠120只
【机 构】
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暨南大学医学院,广东广州,510632;暨南大学附属第一医院中医科
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目的 探讨疏肝健脾方药对非酒精性脂肪性肝炎(NASH)大鼠肝细胞TLR4/p38MAPK信号通路的干预作用,从炎症角度揭示疏肝健脾方药抗大鼠NASH的作用机制.方法 选用SPF级SD大鼠120只,随机分为8组.采用高脂饲料喂养建立大鼠NASH模型,26 w后对肝组织进行HE染色,油红0染色,全自动生化分析肝功血脂改变,ELISA检测血清白介素(IL)-1、IL-6、肿瘤坏死因子(TNF)-α含量;采用离体循环灌注Ⅳ型胶原酶法分离肝细胞,流式细胞术(FCM)对肝细胞纯度进行活性和纯度鉴定.荧光定量PCR检测肝细胞TLR4、p38MAPK mRNA表达量;Western 印迹法检测肝细胞蛋白TLR4、p38 MAPK及磷酸化蛋白p38MAPK表达水平.结果 26 w高脂饮食成功建立了NASH大鼠模型,HE染色和油红0染色证实大鼠模型存在典型的NASH病理改变.与正常组比较,模型组血清IL-1、IL-6、TNF-α含量显著升高(P＜0.01);各用药组与模型组比较,合方高、低剂量组IL-1、IL-6、TNF-α含量显著降低(P＜0.05,P＜0.01),健脾高剂量组IL-1、IL-6含量降低有统计学差异(P＜0.05).与正常组比较,模型组大鼠肝细胞TLR4、p38MAPK mRNA表达及磷酸化蛋白p38MAPK表达量显著增加(P＜0.01);各用药组与模型组比较,合方高、低剂量组,健脾高剂量组TLR4、p38MAPK mRNA蛋白及磷酸化蛋白p38MAPK表达量显著降低(P＜0.05,P＜0.01).结论 疏肝健脾方药能够降低NASH大鼠血清炎症因子水平,改善NASH大鼠肝脏的病理变化,TLR4/p38MAPK可能是疏肝健脾方药发挥抗NASH作用的药物靶点.
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