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猪圆环病毒1型ORF2基因的改造及其在大肠杆菌中的表达

来源 :中国动物检疫 | 被引量 : 0次 | 上传用户：dingyongguo

【摘 要】

：

根据GenBank中猪圆环病毒1型（PCV1）ORF2基因序列，设计合成了一对引物，对PCV1 ORF2基因进行PCR扩增，将扩增出的ORF2基因（702bp）克隆入pMD18-T载体，筛选获得重组质粒命名为pMD-ORF2。由

【作 者】

：

张福良 孙利华 宋长绪 

【机 构】

：

安阳工学院生物与食品学院,广东省农业科院兽医研究所

【出 处】

：

中国动物检疫

【发表日期】

：

2009年6期

【关键词】

：

PCV1 ORF2 克隆 改造 表达 PCV1 ORF2  cloning  reconstructing  expression 

【基金项目】

：

基金项目：国家高技术研究发展计划（863）项目（2003AA241110）

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根据GenBank中猪圆环病毒1型（PCV1）ORF2基因序列，设计合成了一对引物，对PCV1 ORF2基因进行PCR扩增，将扩增出的ORF2基因（702bp）克隆入pMD18-T载体，筛选获得重组质粒命名为pMD-ORF2。由于ORF2前面有120多个信号肽和序列中有大量的稀有密码子，所以将ORF2进行改造并将改造的ORF2双酶切产物插入原核表达载体pET-32α与pET-41α，得到重组子命名为pET-ORF2—1与pET—ORF2—2。用IPTG进行诱导表达，收集菌液进行SDS-PAGE和Weste

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