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【摘要】 目的：比较IHC与FISH检测乳腺浸润性导管癌HER-2的一致性。方法：分别用IHC和FISH对118例乳腺浸润性导管癌HER-2进行检测，比较两者检测结果的相关性。结果：118例浸润性乳腺导管癌标本，IHC检测结果为：14例为（-）；20例为（1+），55例为（2+），29例为（3+）。FISH检测结果为：53例为>2.2，64例为<1.8，1例为1.8-2.2。IHC检测HER-2阳性的病例FISH检测中阳性符合率96.6%（28/29），IHC检测HER-2阴性的病例FISH检测均为阴性，符合率100%（34/34）。IHC检测HER-2（2+）的55例患者中有25例经FISH检测证实HER-2阳性，30例呈阴性。FISH检测共发现5例17号染色体多体，其发生率为4.24%。IHC检测到8例乳腺癌HER-2表达存在异质性，异质性在FISH检测中亦得到证实。结论：IHC与FISH检测乳腺浸润性导管癌HER-2具有高度一致性，免疫组化HER-2（2+）病例需行FISH检测。
【关键词】 浸润性导管癌； HER-2； 免疫组织化学； 荧光原位杂交
【Abstract】 Objective：To compare the consistency of HER-2 in breast infiltrating ductal carcinoma by IHC and FISH detection.Method：HER-2 of 118 cases with breast invasive ductal carcinoma were tested by FISH and IHC detection，and compared the results correlation.Result：118 specimens of invasive ductal carcinoma were seleced， The results tested by IHC were as follows：14 cases（-）；20 cases（1+），55 cases（2+），29 cases （3+）.The results tested by FISH were as follows： 53 cases >2.2， 64 cases <1.8，1 case was 1.8-2.2.HER-2 positive coincidence rate was 96.6%（28/29） by IHC detection in positive cases by FISH detection，HER-2 negative by FISH were in negative of IHC detection， the coincidence rate was 100%（34/34）.25 HER-2 positive cases by FISH detection were among 55 cases of HER-2（2+） by IHC detection， and 30 were the negative.5 cases on chromosome multi-body in 17 were found by FISH detection，its incidence rate was 4.24%.HER-2 expression in 8 cases with of breast cancer exists heterogeneity by IHC detection，and the heterogeneity was also confirmed in FISH detected.Conclusion：HER-2 of breast infiltrating ductal carcinoma by IHC detection was high consistency with FISH detection，HER-2 cases（2+） by immunohistochemical need to be detected by FISH.
【Key words】 Infiltrating ductal carcinoma； HER-2； Immunohistochemistry； Fluorescence in situ hybridization
正确检测和评定乳腺癌的HER-2蛋白表达和基因扩增状态对乳腺癌的临床治疗和预后判断至关重要，HER-2检测结果不仅涉及患者的预后评估，而且是筛选是否适合针对HER2的靶向治疗的先决条件，并且可以对内分泌治疗、化疗方案的选择起到指导作用[1]。近年，乳腺癌组织中HER-2状态检测的应用技术越来越多。大致分为：（1）基于HER-2蛋白水平的检测，如免疫组织化学（IHC）。（2）基于HER-2基因DNA水平的检测，如荧光原位杂交（FISH）。本文收集本科行IHC检测及FISH的乳腺浸润性导管癌病例118例，比较IHC与FISH检测乳腺浸润性导管癌HER-2的一致性，现将结果报告如下。
1 资料与方法
1.1 一般资料 收集2013年11月-2014年10月本科行IHC检测及FISH的乳腺浸润性导管癌病例，共118例。均为女性，其中穿刺标本12例，切除标本106例。
1.2 方法 HER-2基因扩增检测试剂盒购于广州安必平公司。免疫组化HER-2/neu多克隆抗体购自福州迈新。
1.3 检测结果判定标准 参照《乳腺癌HER2检测指南（2014版）》[2]对检测结果进行判定，并由本院2名经专业培训的病理医师进行判读。
1.3.1 IHC检测HER-2的判定方法 对乳腺浸润性癌的癌细胞膜进行定位后染色。（1）阴性：存在≤10%的不完整细胞膜染色，或者无浸润性癌细胞的染色，则记为（-）；（2）弱阳性：>10%的浸润癌细胞呈现不完整的、微弱的细胞膜染色，记为（1+）；（3）可疑阳性：有两种情况，第一种为>10%的浸润癌细胞呈现不完整和/或弱至中等强度的细胞膜染色，第二种为≤10%的浸润癌细胞呈现强而完整的细胞膜染色，记为（2+）；（4）强阳性：>10%的浸润癌细胞呈现强而完整的细胞膜染色，记为（3+）[3]。 1.3.2 FISH检测HER-2的判定方法 首先对HE染色切片中的癌细胞区域进行确定，并选择出满意的杂交信号区域，采用100倍油镜经特意性单通道滤光片对癌细胞核中FISH结果进行观察，并进行cutoff值和信号计数的计算。按照试剂说明书的要求，记录60 个相连续的癌细胞核中的双色信号：（1）如红色、绿色两种信号的比值大于2.2，或者众多信号间连接成团时，则不用计数，可归入基因扩增；（2）如两信号的比值处于1.8-2.2之间，则重新再计数60个相连续的癌细胞。若结果同前，则在FISH的检测报告中注释；（3）如红色、绿色两信号间比值小于1.8，不存在HER-2基因的扩增；如不同癌细胞中的HER-2基因扩增现象具有异质性，则需要另选癌区及计数，并注明在检测报告中[4]。
1.4 统计学处理 本研究中数据的收集与处理均由本院数据处理中心专门人员进行，以保证数据真实性与科学性。初步数据录入EXCEL（2003版）进行逻辑校对与分析；并应用SPSS 22.0对资料进行一般描述，计数资料用（%）表示，采用 字2检验；并进行IHC及FISH一致性检验，计算kappa值和P值，检验水准α=0.05。
2 结果
2.1 IHC及FISH检测结果 IHC检测结果为：（-）病例比例为11.86%；（1+）病例占16.95%，（2+）病例占46.61%，（3+）病例占24.58%。FISH检测结果为：53例为比值>2.2，64例比值<1.8，1例比值为1.8-2.2。见表1。
2.2 本组118例病例中HER-2在伴或不伴17号染色体患者中的基因分状态分布状况分析 IHC检测到8例乳腺癌HER-2表达存在异质性，其发生率为6.78%，异质性在FISH中亦得到证实。FISH检测共发现5例17号染色体多体，其发生率为4.24%，均为IHC（3+）病例。见表2。
2.3 IHC及FISH检测一致性分析 IHC阳性病例29例，FISH检测比值>2.2有28例，1例为1.8-2.2；IHC阴性病例34例，FISH检测比值均为<1.8。免疫组化阳性病例及阴性病例与FISH符合率为98.41%（62/63），kappa值为0.968，P=0.000，具有高度一致性。
3 讨论
HER-2是人类17q21染色体上的基因。该基因的表达不仅和肿瘤的发生、发展相关，更是临床预后评估的重要指标[5]。乳腺癌组织中HER-2状态检测的应用技术越来越多，关于基于HER-2蛋白水平的检测，与基因HERR-2的DNA水平的检测相比，哪种方法更为准确可靠，大多数学者的争论甚多，而争论的焦点在于对17号染色体的多体性的认识[6]。目前研究显示整条17号染色体的多体罕见，CEPl7的多体并不能代表整条第17号染色体多体，部分乳腺癌中17号染色体存在HER-2基因和着丝粒的共同扩增[7]。越来越多的学者认为，HER2拷贝数对于HER2基因扩增的判断更为重要[8]。因此，美国ASCO/CAP 2013版HER-2检测指南及我国《乳腺癌HER2检测指南（2014版）》[2]均强调质量控制，同时推荐了IHC及ISH（in situ hybridization，原位杂交）两种方法。
研究资料显示，IHC检测为-、1+、2+、3+中FISH的符合率分别分：100%、100%、45.45%、96.55%；同时在本研究的118例病例中，IHC与FISH检测乳腺浸润性导管癌HER-2的结果具有高度一致性。与Viale等学者的研究结果相似[9]。IHC是一项广泛而实用的技术，具有检测成本低、操作简单、耗时短、可实现自动化检测和染色后切片便于存档等优点，阅片时可同时进行组织形态学评价，因此，成为乳腺癌患者检测HER-2扩增最常使用的方法[10]。但IHC是一种半定量的方法，结果判定的标准为描述性语言，判读的主观影响较大，未经严格培训的医师判定一致性偏低，较多的病例归入不确定病例[11-12]。尽管ISH成本较贵，但具有高度的稳定性及重复性，尤其是双探针FISH加入了17号染色体着丝粒探针作为内对照。乳腺癌中常见17号染色体的多体现象，在CEP17中平均每个细胞中都至少3个。相关研究显示，17号染色体的多体会增加浸润导管癌中HER-2基因的拷贝数，从而导致了HER-2基因蛋白的过表达，最终造成了IHC检测假阳性结果[13]。FISH的结果判定更为客观，主观影响很小，经培训的医师间判定的一致性极高，已成为HER-2检测的“金标准”[14]，可作为IHC的有益的补充。经阅读相关文献并结合本研究实践后，我们认为免疫组化法检测为（3+）的病例中，IHC和FISH具有较高一致性，可作为诊断的直接依据；而对于诊断为（-）和（1+）的病例而言，IHC结果为阴性者，可选择性予以FISH检测；但检测结果为（2+）的患者，由于两种检测方法的一致性较一般，因此需重点对患者予以FISH检测[15-16]。
综上所述，对于IHC 2+的病例，建议行FISH检测。对于大多数IHC 2+的病例，FISH均能明确HER-2状态，当然，对于FISH无法确定HER-2状态的标本，应积极选择其他方法（如PCR、RNA-ISH等）进行检测。
参考文献
[1]赵伟志，叶晓霞.乳腺浸润性微乳头状癌临床病理学观察及免疫组化分析[J].中国医学创新，2014，3（19）：40-43.
[2]《乳腺癌HER2检测指南（2014版）》编写组.乳腺癌HER2检测指南（2014版）[J]. 中华病理学杂志，2014，43（4）：262-267.
[3] Susini T，Bussani C，Marini，et al.Preoperative assessment of HER-2/neu status in breast carcinoma： the role of quantitative real-time PCR on core-biopsy specimens[J].Gynecologic Oncology，2010，116（2）：234-239. [4]谭敏华，雷伟华，谭冬玲，等.浸润性乳腺癌ER、PR、HER-2、E-cadherin、CK5/6检测与临床预后关系[J].临床与实验病理学杂志，2011，27（9）：933-938.
[5]赵坡，姜学革，李晓瑛，等.FISH检测乳腺癌HER-2基因扩增及17号染色体多体状况及其临床病理学意义的分析[J].中华肿瘤防治杂志，2011，18（9）：680-683.
[6]王立波，王彦荣，席妍，等.mTOR在HER-2阴性乳腺癌中的表达及意义[J].中国实验诊断学，2014，19（8）：1262-1264.
[7] Goud K I，Dayakar S，Vijayalaxmi K，et al.Evaluation of HER-2/neu status in breast cancer specimens using immunohistochemistry （IHC） &；fluorescence in-situ hybridization （FISH） assay[J].The Indian journal of medical research，2012，135（3）：312-317.
[8]张江宇，王颀，郜红艺，等.IHC和FISH检测乳腺癌HER-2表达的对比研究[J].中华肿瘤防治杂志，2013，20（6）：436-439.
[9] Poonam Panjwani，Sridhar Epari，Arti Karpate，et al.Assessment of HER-2/neu status in breast cancer using fluorescence in situ hybridization &；immunohistochemistry：Experience of a tertiary cancer referral centre in India[J].The Indian Journal of Medical Research，2010，132（3）：287-294.
[10]舒文环，仲伟霞.乳腺癌原发灶与转移灶HR和HER-2一致性的研究现状[J].中华肿瘤防治杂志，2011，18（9）：734-736.
[11]刘琪，左文述，王新昭，等.乳腺癌原发灶和淋巴结转移灶激素受体及HER-2与Ki-67表达相关性分析[J].中华肿瘤防治杂志，2013，20（15）：1153-1157.
[12]曹丹霞，何建蓉，沈坤炜，等.激素受体和HER-2及Ki-67预测乳腺癌新辅助化疗疗效价值的分析[J].中华肿瘤防治杂志，2012，19（13）：1000-1003.
[13] Han Zhang，Guoping Ren，Xiaoling Wang，et al.HER-2 gene amplification by fluorescence in situ hybridization（FISH） compared with immunohistochemistry （IHC） in breast cancer：a study of 528 equivocal cases.[J].Breast Cancer Research and Treatment，2012，134（2）：743-749.
[14]吕海军，李峰，吴明霞，等.PCR分析FISH与IHC检测人乳腺癌组织中HER-2表达的差异性[J].中国保健营养（中旬刊），2013，15（5）：51-52.
[15]张青，李小欢，杨真，等.110例乳腺癌患者HER-2基因扩增状况及其与临床病理特征的关系[J].中国医药导报，2013，10（11）：86-88.
[16] Al Khattabi H，Kelany A，Buhmeida A，et al.Evaluation of HER-2/neu gene amplification by fluorescence in situ hybridization and immunohistochemistry in saudi female breast cancer[J].Anticancer Research，2010，30（10）：4081-4088.
（收稿日期：2014-11-07） （本文编辑：陈丹云）
【关键词】 浸润性导管癌； HER-2； 免疫组织化学； 荧光原位杂交
【Abstract】 Objective：To compare the consistency of HER-2 in breast infiltrating ductal carcinoma by IHC and FISH detection.Method：HER-2 of 118 cases with breast invasive ductal carcinoma were tested by FISH and IHC detection，and compared the results correlation.Result：118 specimens of invasive ductal carcinoma were seleced， The results tested by IHC were as follows：14 cases（-）；20 cases（1+），55 cases（2+），29 cases （3+）.The results tested by FISH were as follows： 53 cases >2.2， 64 cases <1.8，1 case was 1.8-2.2.HER-2 positive coincidence rate was 96.6%（28/29） by IHC detection in positive cases by FISH detection，HER-2 negative by FISH were in negative of IHC detection， the coincidence rate was 100%（34/34）.25 HER-2 positive cases by FISH detection were among 55 cases of HER-2（2+） by IHC detection， and 30 were the negative.5 cases on chromosome multi-body in 17 were found by FISH detection，its incidence rate was 4.24%.HER-2 expression in 8 cases with of breast cancer exists heterogeneity by IHC detection，and the heterogeneity was also confirmed in FISH detected.Conclusion：HER-2 of breast infiltrating ductal carcinoma by IHC detection was high consistency with FISH detection，HER-2 cases（2+） by immunohistochemical need to be detected by FISH.
【Key words】 Infiltrating ductal carcinoma； HER-2； Immunohistochemistry； Fluorescence in situ hybridization
正确检测和评定乳腺癌的HER-2蛋白表达和基因扩增状态对乳腺癌的临床治疗和预后判断至关重要，HER-2检测结果不仅涉及患者的预后评估，而且是筛选是否适合针对HER2的靶向治疗的先决条件，并且可以对内分泌治疗、化疗方案的选择起到指导作用[1]。近年，乳腺癌组织中HER-2状态检测的应用技术越来越多。大致分为：（1）基于HER-2蛋白水平的检测，如免疫组织化学（IHC）。（2）基于HER-2基因DNA水平的检测，如荧光原位杂交（FISH）。本文收集本科行IHC检测及FISH的乳腺浸润性导管癌病例118例，比较IHC与FISH检测乳腺浸润性导管癌HER-2的一致性，现将结果报告如下。
1 资料与方法
1.1 一般资料 收集2013年11月-2014年10月本科行IHC检测及FISH的乳腺浸润性导管癌病例，共118例。均为女性，其中穿刺标本12例，切除标本106例。
1.2 方法 HER-2基因扩增检测试剂盒购于广州安必平公司。免疫组化HER-2/neu多克隆抗体购自福州迈新。
1.3 检测结果判定标准 参照《乳腺癌HER2检测指南（2014版）》[2]对检测结果进行判定，并由本院2名经专业培训的病理医师进行判读。
1.3.1 IHC检测HER-2的判定方法 对乳腺浸润性癌的癌细胞膜进行定位后染色。（1）阴性：存在≤10%的不完整细胞膜染色，或者无浸润性癌细胞的染色，则记为（-）；（2）弱阳性：>10%的浸润癌细胞呈现不完整的、微弱的细胞膜染色，记为（1+）；（3）可疑阳性：有两种情况，第一种为>10%的浸润癌细胞呈现不完整和/或弱至中等强度的细胞膜染色，第二种为≤10%的浸润癌细胞呈现强而完整的细胞膜染色，记为（2+）；（4）强阳性：>10%的浸润癌细胞呈现强而完整的细胞膜染色，记为（3+）[3]。 1.3.2 FISH检测HER-2的判定方法 首先对HE染色切片中的癌细胞区域进行确定，并选择出满意的杂交信号区域，采用100倍油镜经特意性单通道滤光片对癌细胞核中FISH结果进行观察，并进行cutoff值和信号计数的计算。按照试剂说明书的要求，记录60 个相连续的癌细胞核中的双色信号：（1）如红色、绿色两种信号的比值大于2.2，或者众多信号间连接成团时，则不用计数，可归入基因扩增；（2）如两信号的比值处于1.8-2.2之间，则重新再计数60个相连续的癌细胞。若结果同前，则在FISH的检测报告中注释；（3）如红色、绿色两信号间比值小于1.8，不存在HER-2基因的扩增；如不同癌细胞中的HER-2基因扩增现象具有异质性，则需要另选癌区及计数，并注明在检测报告中[4]。
1.4 统计学处理 本研究中数据的收集与处理均由本院数据处理中心专门人员进行，以保证数据真实性与科学性。初步数据录入EXCEL（2003版）进行逻辑校对与分析；并应用SPSS 22.0对资料进行一般描述，计数资料用（%）表示，采用 字2检验；并进行IHC及FISH一致性检验，计算kappa值和P值，检验水准α=0.05。
2 结果
2.1 IHC及FISH检测结果 IHC检测结果为：（-）病例比例为11.86%；（1+）病例占16.95%，（2+）病例占46.61%，（3+）病例占24.58%。FISH检测结果为：53例为比值>2.2，64例比值<1.8，1例比值为1.8-2.2。见表1。
2.2 本组118例病例中HER-2在伴或不伴17号染色体患者中的基因分状态分布状况分析 IHC检测到8例乳腺癌HER-2表达存在异质性，其发生率为6.78%，异质性在FISH中亦得到证实。FISH检测共发现5例17号染色体多体，其发生率为4.24%，均为IHC（3+）病例。见表2。
2.3 IHC及FISH检测一致性分析 IHC阳性病例29例，FISH检测比值>2.2有28例，1例为1.8-2.2；IHC阴性病例34例，FISH检测比值均为<1.8。免疫组化阳性病例及阴性病例与FISH符合率为98.41%（62/63），kappa值为0.968，P=0.000，具有高度一致性。
3 讨论
HER-2是人类17q21染色体上的基因。该基因的表达不仅和肿瘤的发生、发展相关，更是临床预后评估的重要指标[5]。乳腺癌组织中HER-2状态检测的应用技术越来越多，关于基于HER-2蛋白水平的检测，与基因HERR-2的DNA水平的检测相比，哪种方法更为准确可靠，大多数学者的争论甚多，而争论的焦点在于对17号染色体的多体性的认识[6]。目前研究显示整条17号染色体的多体罕见，CEPl7的多体并不能代表整条第17号染色体多体，部分乳腺癌中17号染色体存在HER-2基因和着丝粒的共同扩增[7]。越来越多的学者认为，HER2拷贝数对于HER2基因扩增的判断更为重要[8]。因此，美国ASCO/CAP 2013版HER-2检测指南及我国《乳腺癌HER2检测指南（2014版）》[2]均强调质量控制，同时推荐了IHC及ISH（in situ hybridization，原位杂交）两种方法。
研究资料显示，IHC检测为-、1+、2+、3+中FISH的符合率分别分：100%、100%、45.45%、96.55%；同时在本研究的118例病例中，IHC与FISH检测乳腺浸润性导管癌HER-2的结果具有高度一致性。与Viale等学者的研究结果相似[9]。IHC是一项广泛而实用的技术，具有检测成本低、操作简单、耗时短、可实现自动化检测和染色后切片便于存档等优点，阅片时可同时进行组织形态学评价，因此，成为乳腺癌患者检测HER-2扩增最常使用的方法[10]。但IHC是一种半定量的方法，结果判定的标准为描述性语言，判读的主观影响较大，未经严格培训的医师判定一致性偏低，较多的病例归入不确定病例[11-12]。尽管ISH成本较贵，但具有高度的稳定性及重复性，尤其是双探针FISH加入了17号染色体着丝粒探针作为内对照。乳腺癌中常见17号染色体的多体现象，在CEP17中平均每个细胞中都至少3个。相关研究显示，17号染色体的多体会增加浸润导管癌中HER-2基因的拷贝数，从而导致了HER-2基因蛋白的过表达，最终造成了IHC检测假阳性结果[13]。FISH的结果判定更为客观，主观影响很小，经培训的医师间判定的一致性极高，已成为HER-2检测的“金标准”[14]，可作为IHC的有益的补充。经阅读相关文献并结合本研究实践后，我们认为免疫组化法检测为（3+）的病例中，IHC和FISH具有较高一致性，可作为诊断的直接依据；而对于诊断为（-）和（1+）的病例而言，IHC结果为阴性者，可选择性予以FISH检测；但检测结果为（2+）的患者，由于两种检测方法的一致性较一般，因此需重点对患者予以FISH检测[15-16]。
综上所述，对于IHC 2+的病例，建议行FISH检测。对于大多数IHC 2+的病例，FISH均能明确HER-2状态，当然，对于FISH无法确定HER-2状态的标本，应积极选择其他方法（如PCR、RNA-ISH等）进行检测。
参考文献
[1]赵伟志，叶晓霞.乳腺浸润性微乳头状癌临床病理学观察及免疫组化分析[J].中国医学创新，2014，3（19）：40-43.
[2]《乳腺癌HER2检测指南（2014版）》编写组.乳腺癌HER2检测指南（2014版）[J]. 中华病理学杂志，2014，43（4）：262-267.
[3] Susini T，Bussani C，Marini，et al.Preoperative assessment of HER-2/neu status in breast carcinoma： the role of quantitative real-time PCR on core-biopsy specimens[J].Gynecologic Oncology，2010，116（2）：234-239. [4]谭敏华，雷伟华，谭冬玲，等.浸润性乳腺癌ER、PR、HER-2、E-cadherin、CK5/6检测与临床预后关系[J].临床与实验病理学杂志，2011，27（9）：933-938.
[5]赵坡，姜学革，李晓瑛，等.FISH检测乳腺癌HER-2基因扩增及17号染色体多体状况及其临床病理学意义的分析[J].中华肿瘤防治杂志，2011，18（9）：680-683.
[6]王立波，王彦荣，席妍，等.mTOR在HER-2阴性乳腺癌中的表达及意义[J].中国实验诊断学，2014，19（8）：1262-1264.
[7] Goud K I，Dayakar S，Vijayalaxmi K，et al.Evaluation of HER-2/neu status in breast cancer specimens using immunohistochemistry （IHC） &；fluorescence in-situ hybridization （FISH） assay[J].The Indian journal of medical research，2012，135（3）：312-317.
[8]张江宇，王颀，郜红艺，等.IHC和FISH检测乳腺癌HER-2表达的对比研究[J].中华肿瘤防治杂志，2013，20（6）：436-439.
[9] Poonam Panjwani，Sridhar Epari，Arti Karpate，et al.Assessment of HER-2/neu status in breast cancer using fluorescence in situ hybridization &；immunohistochemistry：Experience of a tertiary cancer referral centre in India[J].The Indian Journal of Medical Research，2010，132（3）：287-294.
[10]舒文环，仲伟霞.乳腺癌原发灶与转移灶HR和HER-2一致性的研究现状[J].中华肿瘤防治杂志，2011，18（9）：734-736.
[11]刘琪，左文述，王新昭，等.乳腺癌原发灶和淋巴结转移灶激素受体及HER-2与Ki-67表达相关性分析[J].中华肿瘤防治杂志，2013，20（15）：1153-1157.
[12]曹丹霞，何建蓉，沈坤炜，等.激素受体和HER-2及Ki-67预测乳腺癌新辅助化疗疗效价值的分析[J].中华肿瘤防治杂志，2012，19（13）：1000-1003.
[13] Han Zhang，Guoping Ren，Xiaoling Wang，et al.HER-2 gene amplification by fluorescence in situ hybridization（FISH） compared with immunohistochemistry （IHC） in breast cancer：a study of 528 equivocal cases.[J].Breast Cancer Research and Treatment，2012，134（2）：743-749.
[14]吕海军，李峰，吴明霞，等.PCR分析FISH与IHC检测人乳腺癌组织中HER-2表达的差异性[J].中国保健营养（中旬刊），2013，15（5）：51-52.
[15]张青，李小欢，杨真，等.110例乳腺癌患者HER-2基因扩增状况及其与临床病理特征的关系[J].中国医药导报，2013，10（11）：86-88.
[16] Al Khattabi H，Kelany A，Buhmeida A，et al.Evaluation of HER-2/neu gene amplification by fluorescence in situ hybridization and immunohistochemistry in saudi female breast cancer[J].Anticancer Research，2010，30（10）：4081-4088.
（收稿日期：2014-11-07） （本文编辑：陈丹云）